Субпопуляции лимфоцитов что это значит

Субпопуляции лимфоцитов что это значит

Исследование включает в себя определение абсолютных и относительных значений субпопуляционного состава Т-лимфоцитов (CD3, CD4, CD8, CD45) и соотношения Т-хелперы / Т-цитотоксические клетки. Рекомендуется к назначению для контроля показателей клеточного звена иммунной системы в динамике после комплексного иммунологического обследования.

Иммунофенотипирование, клеточный иммунитет, многоцветный клеточный анализ методом проточной цитометрии, Т-клетки, Т-хелперы, Т-цитотоксические клетки.

Human Immune System, Immunophenotyping, Multicolor Flow Cytometry Cell Analysis, Human Leukocyte Differentiation Antigens, Human T cells, T helper cells, Cytotoxic T cells.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
• Детям в возрасте до 1 года не принимать пищу в течение 30-40 минут до исследования.
• Детям в возрасте от 1 до 5 лет не принимать пищу в течение 2-3 часов до исследования.
• Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования, можно пить чистую негазированную воду.
• Полностью исключить (по согласованию с врачом) прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием.
• Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
• Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Оценка клеточного состава (иммунофенотипирование) лимфоцитов крови человека — основной компонент в оценке иммунного статуса выполняется методом проточной цитофлуориметрии.

Иммунофенотипирование — характеристика клеток при помощи моноклональных антител или каких-либо других зондов, позволяющих судить об их типе и функциональном состоянии по наличию того или иного набора клеточных маркеров.

Иммунофенотипирование лейкоцитов заключается в обнаружении на их поверхности маркеров дифференциации, или CD антигенов. Лейкоциты экспрессируют ряд поверхностных и цитоплазматических антигенов, уникальных для своей субпопуляции и стадии развития. CD антигены (англ. cluster of differentiation antigens) — это антигены на поверхности клеток, маркеры, отличающие одни типы клеток от других. Дифференциации этих антигенов изучены и стандартизованы, им присвоены определенные номера. CD могут быть распознаны с помощью соответствующих моноклональных антител. Используя флюоресцентно-меченые моноклональные антитела, связывающиеся с определенными CD, можно с помощью метода проточной цитометрии произвести подсчёт содержания лимфоцитов, относящихся к различным по функции или стадии развития субпопуляциям.

В основе проточной цитофлуориметрии лежит проведение фотометрических и флюоресцентных измерений отдельных клеток, пересекающих одна за другой вместе с потоком жидкости луч монохроматического света, обычно света лазера.

Этот маркер позволяет идентифицировать зрелые покоящиеся (интактные) Т-клетки и подсчитать общее количество Т-лимфоцитов. Количественная оценка субпопуляции CD3+ лимфоцитов имеет диагностическую значимость в следующих случаях:

— первичные и вторичные иммунодефициты;

— острые вирусные инфекции, включая ВИЧ;

— внутриклеточные бактериальные и паразитарные инфекционные заболевания (например, туберкулез, лепра, лейшманиоз);

— реакции отторжения трансплантатов и болезни «трансплантат против хозяина»;

— лимфопролиферативные расстройства (острый Т-лимфобластный лейкоз).

При сахарном диабете довольно часто наблюдается снижение у больных процентного содержания и абсолютного числа СD3+ лимфоцитов.

Использование МКА к CD4 антигену дает возможность количественно охарактеризовать особый клон клеток, получивших название Т-хелперов/индукторов. СD4+ клетки в функциональном отношении делятся на два вида хелперных лимфоцитов: Т-хелперы 1-го порядка (Th1-клетки) и 2-го порядка (Th2-клетки). Различные CD4+ Т-клетки продуцируют разные наборы цитокинов. Th1-клетки (их еще называют клетками гиперчувствительности замедленного типа – ГЗТ) – цитокины для клеточного иммунного ответа – интерлейкин 2 (IL-2), IL-3, g-IFN, TNF-a, TNF-b, – среди которых дискриминантным цитокином является g-IFN. Th2 секретируют набор цитокинов, необходимый для гуморального иммунного ответа: IL-3, 4, 5, 6, 10, 13, TNF-b, среди которых дискриминантным цитокином является IL-4.

Определение количества CD4+ клеток имеет значение при диагностике состояний, связанных с дефектами антителопродукции и реакций клеточноопосредованного иммунитета. Показателю числа CD4+ клеток отводится решающая роль для прогноза течения ВИЧ-инфекции.

Функциональное состояние CD4+ лимфоцитов тестируют по цитокиновому профилю: функциональная полноценность Th1-клеток подтверждается по секреции g-IFN, а Th2-клеток – по секреции IL-4.

Дифференцировочная молекула CD8 представляет собой гликопротеин, обнаруживаемый на поверхности тимоцитов и Т-лимфоцитов и участвующий в распознавании антигенных пептидов в контексте с молекулами главного комплекса гистосовместимости (MHC) класса I.

Клиническая значимость определения количества СD8+ лимфоцитов:

• вирусные инфекции (при определенной модификации имеется возможность количественной оценки вирусоспецифических цитолитических CD8+ Т-лимфоцитов);
• при ряде заболеваний большое прогностическое значение имеет соотношение между CD4- и CD8-субпопуляциями Т-лимфоцитов (иммунорегуляторный индекс CD4/CD8); например, прогрессирующее снижение иммунорегуляторного индекса у ВИЧ-инфицированных больных может свидетельствовать о переходе в СПИД;
• злокачественные новообразования;
• оценка эффективности проведенной вакцинации (в особенности противовирусными вакцинами).

До недавнего времени приписываемая субпопуляции CD8+ клеток супрессорная активность сейчас практически полностью отвергается. По данным большинства экспериментальных и клинических исследований, считается, что существование какой-либо отдельной популяции Т-супрессорных клеток даже без привязки к CD8-маркеру маловероятно.

При аутоиммунных тиреоидитах, в частности при диффузном токсическом зобе (ДТЗ), в реакциях клеточного иммунитета отмечается снижение субпопуляции CD8+ лимфоцитов и снижение функциональной активности цитотоксических лимфоцитов.

При сахарном диабете также отмечается снижение функциональной активности и количества CD8+ лимфоцитов.

Снижение фракции СD8+ лимфоцитов наблюдается также у больных с первичной хронической недостаточностью коры надпочечников (болезнь Аддисона).

Метод позволяет определить количественное соотношение основных популяций Т-лимфоцитов:

• Т-лимфоциты (CD3 + CD19 — );
• Т-хелперы/индукторы ( CD3 + CD4 + CD45 + );
• Т-цитотоксические лимфоциты (Т-ЦТЛ) ( CD3 + CD8 + CD45 + );
• соотношение Т-хелперы / Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD4 + / CD3 + CD8 + ).

Когда назначается исследование?

Рекомендовано для комплексного обследования пациентов, входящих в группу риска по четырем основным иммунопатологическим синдрома.

С инфекционным синдромом:

• частые ОРВИ, хронические инфекции ЛОР-органов (гнойные синуситы, отиты, периодически встречающиеся лимфадениты, пневмонии с тенденцией к рецидивированию, бронхоплевропневмонии);
• бактериальные инфекции кожи и подкожной клетчатки (пиодермии, фурункулез, абсцессы, флегмоны, септические гранулемы, рецидивирующий парапроктит у взрослых);
• урогенитальные инфекции;
• грибковые поражения кожи и слизистых оболочек, кандидоз, паразитарные инвазии;
• рецидивирующий герпес различной локализации;
• гастроэнтеропатия с хронической диареей неясной этиологии, дисбактериозом;
• длительный субфебрилитет, лихорадка неясной этиологии;
• генерализованные инфекции: сепсис, гнойные менингиты.

С аллергическим (атопическим) синдромом:

• атопический дерматит;
• нейродермит;
• экзема с инфекционным компонентом;
• тяжелая атопическая бронхиальная астма, поллиноз, хронический астматический бронхит.

С аутоиммунным синдромом:

• ревматоидный артрит;
• рассеянный склероз;
• диффузные заболевания соединительной ткани (системная красная волчанка, склеродермия, дерматомиозит);
• аутоиммунный тиреоидит;
• неспецифический язвенный колит;

С иммунопролиферативным синдромом:

• опухолевые процессы в иммунной системе (лимфомы, болезнь Ходжкина, острый и хронический лимфолейкоз, саркома Капоши).

Что означают результаты?

Изменения различных клеточных популяций лимфоцитов в сторону повышения или понижения развиваются при различных патологических процессах в организме, таких как инфекции, аутоиммунные и онкологические заболевания, иммунодефициты, в постоперационном периоде, при трансплантации органов.

Ниже представлена таблица с клиническими ситуациями, которые могут приводить к изменениям в субпопуляционном составе лимфоцитов.

Субпопуляция лимфоцитов

Повышение показателя

Снижение показателя

• Острые и хронические инфекции;

• длительный прием лекарственных препаратов (особенно монотерапия);

• прием биологически активных добавок;

• интенсивные занятия спортом;

• Некоторые виды инфекций;

• алкогольный цирроз печени;

• прием иммуносупрессивных препаратов.

• Ряд аутоиммунных заболеваний;

• отдельные Т-клеточные лейкозы;

• отравление солями бериллия.

• Иммунодефицитные состояния (основной лабораторный признак вторичного иммунодефицита);

• алкогольная болезнь печени;

• прием иммуносупрессивных препаратов или стероидов.

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3 + CD8 + CD45 + )

• Некоторые вирусные инфекции;

• ряд Т-клеточных лейкозов;

• острая фаза аллергии;

• ряд аутоиммунных патологий.

• Некоторые виды аутоиммунных, аллергических заболеваний;

В совокупности с клиническими данными, симптоматикой, другими методами лабораторных исследований вышеуказанные изменения являются диагностическим признаком возникновения этих патологических процессов в организме человека.

• Результаты данного исследования необходимо сопоставлять с клиническими данными и показателями других лабораторных анализов.
• Оценка показателей в динамике существенно повышает клиническую значимость исследования.

Источник

Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Описание

Показания

Подготовка

Интерпретация

Описание исследования

Данный тест предназначен для иммунофенотипирования (оценки клеточного состава) лимфоцитов крови человека с целью определения его иммунного статуса – комплексного показателя работы иммунной системы. В качестве зондов используются моноклональные антитела, позволяющие охарактеризовать тип и функциональное состояние клеток по определенным наборам клеточных маркеров дифференциации (CD-антигенам).

Представители каждой субпопуляции лейкоцитов на разных стадиях содержат поверхностные и цитоплазматические антигены, характерные только для определенного вида и периода развития. Другими словами, CD-антигены – это антигены на поверхности клеток, по которым одни типы клеток отличаются от других. Существует стандартизация и дифференциация CD-антигенов, им присвоены определенные номера. Исследование проводится посредством метода проточной цитометрии. Он основан на выявлении фотометрических и флюоресцентных изменений отдельных клеток, проходящих вместе с жидкостью через луч монохоматического света. Метод позволяет с помощью флюоресцентно-меченых моноклональных антител посчитать количество лимфоцитов, относящихся к различным субтипам или находящихся на разных стадиях развития.

В рамках теста определяются следующие показатели:

• Лимфоциты, абс.;
• Т-лимфоциты (CD3+), %;
• Т-лимфоциты (CD3+) кл/мкл;
• Т-хелперы (CD3+CD4+), %;
• Т-хелперы (CD3+CD4+) кл/мкл;
• Т-цитотоксины (CD3+CD8+), %;
• Т-цитотоксины (CD3+CD8+) кл/мкл;
• Иммунорегуляторный индекс;
• B-лимфоциты (CD19+), %;
• B-лимфоциты (CD19+) кл/мкл;
• EKK (CD3-CD16+CD56+), %;
• EKK (CD3-CD16+CD56+) кл/мкл;
• T-EK (CD3+CD16+CD56+), %.

Характеристика основных подтипов лейкоцитов, исследуемых в тесте:

1. Т-лимфоциты. Созревание клеток происходит в тимусе (вилочковой железе – важном органе иммунной системы, расположенном в верхнем отделе грудной клетки), откуда и пошло их название. В их задачу входит контроль работы В-лимфоцитов, отвечающих за гуморальный ответ иммунной системы – продукцию антител.

Т-хелперы – подвид Т-лимфоцитов. Поверхность данных клеток содержит структуры, способные распознавать антигены, обнаруженные вспомогательными клетками. Также они принимают участие в регуляции иммунного ответа посредством продукции цитокинов (небольших информационных молекул).

Роль цитотоксических Т-клеток состоит в распознавании фрагментов антигена на поверхности клетки-мишени, направлении своих гранул по направлению к обнаруженной мишени и высвобождении их содержимого при непосредственном контакте с ней.

2. В-лимфоциты. Вырабатываются данные клетки в лимфоидной системе (лимфоузлах и периферических органах). Поверхность этих клеток содержит антитела-рецепторы к антигенам. При контакте с антигенами происходит деление В-лимфоцитов и дифференциация их в вырабатывающие антитела плазматические клетки, которые обеспечивают гуморальный иммунитет.

3. ЕКК. Естественные (или натуральные) клетки-киллеры проявляют неиммунную цитотоксическую активность к неопластически измененным (опухолевым) клеткам-мишеням. ЕКК не относятся ни к моноцитам, ни к зрелымВ- или Т-лимфоцитам.

4. Т-ЕК проявляют естественную неиммунную киллерную активность и проявляют признаки Т-лимфоцитов.

Подготовка к исследованию

Кровь сдается строго натощак после воздержания от пищи в течение:

• взрослые – 8-14 часов;
• дети в возрасте 1-5 лет – 2-3 часа;
• дети до года – 30-40 минут.

Можно пить негазированную воду. От употребления кофе, чая, соков следует воздержаться.

• накануне обследования рекомендуется воздерживаться от физических и эмоциональных перегрузок;
• за сутки до отбора пробы запрещено употребление алкогольных напитков, минимум за час – курение;
• за сутки перед проведением обследования при наличии возможности и с разрешения лечащего врача исключить прием любых лекарственных препаратов;
• непосредственно перед сдачей крови желательно 10-15 минут спокойно посидеть.

Забор крови не рекомендуется осуществлять после инструментального, ректального, мануального, рентгеновского, ультразвукового обследований, биопсии, кольпоскопии, гастроскопии, флюорографии, физиопроцедур, массажа, прочих диагностических и/или терапевтических манипуляций.

Показания к исследованию

а) при наличии затяжных, хронических, рецидивирующих инфекционных заболеваний:

• часто повторяющихся ОРВИ;
• хронических ЛОР-заболеваниях (отитах, гнойных синуситах, рецидивирующих воспалениях легких, бронхоплевропневмониях, периодических лимфаденитах);
• бактериальных кожных и подкожных инфекциях(фурункулезе, флегмонах, пиодермиях, септических гранулемах, абсцессах, рецидивирующих гнойных воспалениях прямой кишки (парапроктитах));
• инфекционных заболеваниях мочеполовой системы;
• поражении грибком кожи и слизистых оболочек;
• заражении паразитами;
• рецидивирующем герпесе;
• дисбактериозе;
• гастроэнтеропатии, сопровождаемой хроническим поносом неясной этиологии;
• присутствии длительное время без определенных причин субфебрильной температуры, лихорадки;
• генерализированных инфекциях (например, гнойных менингитах, сепсисе);

b) при подозрении на приобретенный или обусловленный генетически иммунодефицит;

c) при аутоиммунных заболеваниях (характеризуются атакой иммунной системой на здоровые клетки собственного организма, что приводит к поражению здоровых тканей и развитию аутоиммунных воспалительных процессов):

• рассеянном склерозе (образовании множественных рубцов на миелиновой оболочке нервных волокон головного и спинного мозга);
• ревматоидном артрите (поражении суставов);
• аутоиммунном тиреоидите (воспалении щитовидной железы);
• неспецифическом язвенном колите (рецидивирующем воспалительном заболевании толстой кишки);
• диффузных заболеваниях соединительной ткани (склеродермии, системной красной волчанке, дерматомиозите);

d) при аллергических заболеваниях:

• атопическом дерматите;
• нейродермите;
• экземе с присутствием инфекции;
• хроническом астматическом бронхите;
• тяжелой атопической бронхиальной астме;
• поллинозе (сезонной аллергической реакции на пыльцу);

e) при подозрении на СПИД;

f) при онкологических заболеваниях иммунной системы:

• болезни Ходжкина (раке лимфатических узлов);
• саркоме Капоши (многоочаговой сосудистой опухоли);
• лимфоме (раке, поражающем лимфатическую систему организма);
• остром и хроническом лимфолейкозе (болезни, характеризуемой прогрессирующим накоплением злокачественных В-лимфоцитов и поражающей на начальной стадии костный мозг, лимфоузлы, селезенку, периферическую кровь);

g) с целью обследования лиц перед и после трансплантации органов;

h) перед сложными операциями;

i) при осложнениях в послеоперационный период;

j) для осуществления контроля лечения, проводимого с применением цитостатиков (противоопухолевых препаратов), иммунодепрессантов (препаратов, искусственно угнетающих иммунную систему), иммуномодуляторов (препаратов, способных менять в любую сторону ответ иммунной системы организма).

Интерпретация исследования

Абсолютное количество клеток различных подтипов лимфоцитов измеряется в клетках в микролитре (кл/мкл), относительное – в процентах (%).

Иммунорегуляторный индекс – относительный показатель, рассчитываемый как соотношение CD4+ клеток (Т-хелперов) к CD8+ клеткам (Т-цитотоксическим клеткам).

Причиной изменения в составе субпопуляций лимфоцитов могут быть различные патологии, в частности, осложнения после оперативного вмешательства, трансплантации органов, при иммунодефиците, инфекциях, онкологических, аллергических, аутоиммунных заболеваниях. В таблице ниже отражены клинические ситуации, которые могут стать причиной изменения субпопуляционного состава лимфоцитов:

Субпопуляция лимфоцитов

Показатель повышается:

Показатель понижается:

• при острых и хронических инфекциях;
• при нарушении гормонального баланса;
• при продолжительном приеме лекарственных препаратов (особенно при терапии с применением одного лекарственного средства);
• при применении биологически активных добавок;
• при интенсивных спортивных нагрузках;
• при беременности;
• при Т-клеточных лейкозах;

• при некоторых инфекционных заболеваниях;
• при иммунодефицитных состояниях;
• при алкогольном циррозе печени;
• при карциноме (раке) печени;
• при аутоиммунных заболеваниях;
• при применении иммуносупрессивных препаратов;

• при некоторых аутоиммунных заболеваниях;
• при нарушении гормонального баланса;
• при некоторых инфекционных заболеваниях;
• при отдельных Т-клеточных лейкозах;
• при отравлении солями бериллия;

• при иммунодефицитных состояниях (понижение уровня Т-хелперов является основным лабораторным признаком вторичного иммунодефицита);
• при алкогольном поражении печени;
• при аутоиммунных заболеваниях;
• при применении стероидов или иммуносупрессивных препаратов;

Т-цитотоксические лимфоциты (CD3+CD8+CD45+)

• при некоторых вирусных инфекциях;
• при ряде Т-клеточных лейкозов;
• после наркоза;
• в острой фазе аллергии;
• при ряде аутоиммунных заболеваний;

• при некоторых аутоиммунных и аллергических заболеваниях;
• при проведении иммуносупрессивной терапии;

• при ряде аутоиммунных заболеваний;
• при стрессе;
• при В-клеточных лимфомах;
• при длительной экспозиции формальдегидом;

• при гипореактивности;
• при перераспределении В-лимфоцитов в очаги воспаления;
• при общем вариабельном иммунодефиците;
• при наследственном иммунодефиците;
• при введении внутривенно антител;
• при алкогольном циррозе печени;

Естественные киллеры (CD3-CD56+CD45+), (CD3-CD16+CD45+)

• в стадии восстановления после вирусных инфекций (гепатита В, С);
• при ряде аутоиммунных патологий;
• при онкологических заболеваниях;
• при беременности;
• при алкогольном циррозе печени;

• при некоторых инфекциях;
• при ряде аутоиммунных патологий;
• при интенсивном курении;
• при проведении иммуносупрессивной терапии и лечении стероидами;

Т-естественные киллеры (CD3+CD56+CD45+)

• при длительных хронических воспалительных процессах;
• при тяжелом течении воспалительных процессов;
• при длительной персистенции антигена в организме.

Диагностического значения не имеет.

Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже (референсные значения указаны в графе «Нормы интерпретации»):

Ф.И.О.: Иванов Иван Иванович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх

Дата исследования: хх.хх.хххх

Исследование

Результат

Нормы интерпретации

Примечание

[287] Фенотипирование лимфоцитов (основные субпопуляции) — CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD56

Дата выдачи (дата исследования): хх.хх.хххх

Источник