Иммуноферментный анализ отрицательный что это значит

Что такое ИФА?

Иммуноферментный анализ в клинике

Иммуноферментный анализ (ИФА) — лабораторное исследование основанное на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций “антиген-антитело”. Суть метода — выявление специфических антител с помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить присутствие или отсутствие антител и их количество.
Есть десятки модификаций ИФА. Его применяют для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов ( IgA IgM IgG) к антигенам различных возбудителей болезней. Методом ИФА можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ, определить антитела к любой половой инфекции. Материалом для исследования может служить кровь, спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.

В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом, а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня.

Какие инфекции можно выявить методом ИФА

В основном ИФА применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями), ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов. Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции, цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций. Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях, уровня гормонов, аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.

Определение наличия и уровня антител в крови не рекомендуется применять для первичной диагностики инфекций, передающихся половым путем. Единственное исключение — по результатам ИФА возможно распознавание сифилиса в комплексе с реакцией микропреципитации. Но наличие антител в сыворотке крови может свидетельствовать только о контакте организма с возбудителем в данное время или ранее.

Исследование наличия и уровня антител различных классов в некоторых случаях помогает определить стадию инфекционного процесса.

К сожалению, такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител не имеет большого значения в практической работе — т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств.

Преимущества ИФА относительно других методов обнаружения антигенов и антител:

— легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания.

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию.

Для постановки диагноза по методу ИФА используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику. Надо учитывать, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР или другими методами.

ДИАГНОСТИКА АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Антинуклеарные антитела— это аутоантитела к антигенам ядра клеток. Они образуют иммунные комплексы и откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов, тем самым вызывая воспаление и повреждение тканей и сосудов. Образование таких антител характерно для системных аутоиммунных заболеваний. Исследование на антинуклеарные антитела проводится если врача подозревает системное аутоиммунное заболевание.

Антитела к двухспиральной ДНК образуются при системных аутоиммунных поражениях соединительной ткани. Эти иммунные комплексы откладываются на тканях, стенках сосудов и вызывают их повреждение. Антитела к двухспиральной ДНК специфичны для системной красной волчанки.

Антитела к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин) — скрининговый тест на антитела к растворимым ядерным антигенам — (SSA(Ro), SSB(La), Sm, RNP, Jo1, Scl70). Образуются при многих системных аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка, синдром Шегрена, склеродермия, полимиозиты, смешанное заболевание соединительной ткани, ревматоидный артрит). Положительные значения анализа являются аргументом наличия у больного аутоиммунного процесса и является показанием для дифференцированного определения титров антител к различным ENA для более точной постановки диагноза. Для дифференцированного определения антител к растворимым ядерным антигенам применяется иммуноферментный анализ -комбинированный ENA.

Антикардиолипиновые антитела IgG, IgM — это аутоантитела к отрицательно заряженным или нейтральным фосфолипидам, фосфолипидсвязывающими сывороточными белками. Антитела к фосфолипидам нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая сужение сосудов и образование сосудистых тромбов. Обследование назначают при подозрении на антифосфолипидный синдром (рецидивирующие венозные и/или артериальные тромбозы).

Качественное и полуколичественное иммуноферментное определение специфических антител класса IgG к цитрулиновому пептиду. Тест система предназначена для диагностики ревматоидного артрита различных стадий, в т.ч. начало заболевания, когда клинические проявления слабо выражены. Эффективность теста для пациентов с клинически подтвержденным ревматоидным артритом составляет от 78 до 88%.

Ревматоидный фактор обнаруживают при ревматоидном артрите, особенно при наиболее частой и распространенной форме хронического воспаления суставов, именуемой синовиит. 75-80% больных ревматоидным артритом имеют ревматоидный фактор, однако, он не специфичен для ревматоидного артрита так как обнаруживается у здоровых лиц и при ряде других заболеваний.

С реактивный белок — маркер воспалительного процесса. Использование высоко чувствительных импортных тест-систем позволяет выявлять С реактивный белок не только при высоко активном воспалительном процессе, но при хроническом и вялотекущем.

ANCA скрин— определение аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (протеиназа 3, миелопероксидаза ). Анализ назначают при подозрении на системные васкулиты, гломерулонефрит.

Все перечисленные исследования доступны в лаборатории клинической иммуногенетики института

Все вышеназванные анализы и методы диагностики доступны всем, без исключения, пациентам, обратившимся в отделение лабораторной диагностики клиники.

Источник

Сифилис. Иммуноферментный анализ на выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса

Что это за анализ? Это выявление суммарных антител класса M и G к возбудителю сифилиса, которое может использоваться как эффективный сверхчувствительный скрининговый тест для диагностики раннего инфицирования сифилисом.

На данный момент Реакция Вассермана считается устаревшей, и с 2006 года для диагностики сифилиса почти не применяется. Ее заменили более чувствительные и современные анализы. Однако на бланках до сих пор выводят неизменное «RW». Подпись «RW » — это дань традиции, маленькое негласное правило среди врачей: оставляя старую подпись, сейчас имеют в виду новые современные анализы на сифилис.

Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь

Treponema pallidum (бледная трепонема) – бактерии, которая вызывает сифилис – хроническое венерическое инфекционное заболевание, которое чаще всего передается половым путем, например при прямом контакте с сифилитической язвой (твердым шанкром), также возможно внутриутробное заражение.

Источником инфекции является больной человек. Сифилис легкоизлечим, но грозит серьезными проблемами со здоровьем при бездействии. Инфицированная мать способна передавать заболевание своему плоду, у которого могут развиться серьёзные и необратимые изменения.

Сифилис относят к классическим заболеваниям, передающимся половым путем (венерическим болезням). Возбудитель – бледная трепонема (Treponema pallidum). Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов

Симптомы сифилиса

Симптомы сифилиса очень разнообразны. Они меняются в зависимости от стадии заболевания. Выделяют три стадии сифилиса:

Первичный сифилис возникает после окончания инкубационного периода. В месте проникновения возбудителя в организм (половые органы, слизистая рта или прямой кишки) возникает безболезненная язва с плотным основанием (твердый шанкр). Через 1-2 нед после возникновения язвы увеличиваются ближайшие лимфатические узлы (при локализации язвы во рту увеличиваются подчелюстные, при поражении половых органов – паховые). Язва (твердый шанкр) самостоятельно заживает в течение 3-6 нед. после возникновения.

Вторичный сифилис начинается через 4-10 нед после появления язвы (2-4 мес. после заражения). Он характеризуется симметричной бледной сыпью по всему телу, включая ладони и подошвы. Возникновение сыпи нередко сопровождается головной болью, недомоганием, повышением температуры тела (как при гриппе). Увеличиваются лимфатические узлы по всему телу. Вторичный сифилис протекает в виде чередования обострений и ремиссий (бессимптомных периодов). При этом возможно выпадение волос на голове, а также появление разрастаний телесного цвета на половых органах и в области заднего прохода (широкие кондиломы).

Третичный сифилис возникает в отсутствие лечения через много лет после заражения. При этом поражается нервная система (включая головной и спинной мозг), кости и внутренние органы (включая сердце, печень и т. д.).

При заражении во время беременности у ребенка возможен врожденный сифилис.

Осложнения сифилиса

По результатам научных исследований, в отсутствие лечения примерно у трети больных развивается третичный сифилис. Примерно четверть больных из-за него погибает. Врожденный сифилис может приводить к тяжелым поражениям или смерти ребенка.

Лечение сифилиса

Достаточно сложное и требует дальнейшего длительного наблюдения. Стоит отметить, что лечение сифилиса на ранних стадиях не представляет особенной сложности с точки зрения выбора препаратов. Особенность бледной трепонемы заключается в том, что она все еще сохраняет чувствительность к пенициллину, который является препаратом выбора при сифилисе.

В случае аллергии на пенициллин назначают антибиотики из ряда макролидов (эритромицин,кларитромицин) или цефалоспоринов (цефтриаксон и тд). Препараты назначаются внутримышечно или в таблетках. Лечение активных форм заболевания проходит в стационарных условиях, пациенты с латентной формой могут получать амбулаторную терапию. Длительность лечения зависит от стадии заболевания и может занимать от нескольких недель до нескольких лет.

Антитела к возбудителю сифилиса

Когда происходит контакт человека с T. pallidum, его иммунная система реагирует, вырабатывая антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида антител к бледной трепонеме: IgM и IgG. В ответ на инфицирование T. pallidum антитела IgM к T. pallidum вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются у большинства пациентов в конце второй недели заболевания и присутствуют у них в первичную и вторичную стадию. Иммуноглобулины класса G к T. pallidum в определяемых количествах появляются в крови через 3-4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и на 6-й неделе начинает преобладать над концентрацией IgM, достигая максимума, а затем сохраняется на определённом уровне в течение длительного времени. Начиная с 4-й недели в крови нарастает количество обоих видов иммуноглобулинов, что ведет к положительному результату теста на суммарные антитела к T. Pallidum. Это позволяет использовать данное исследование для ранней диагностики инфицирования T. pallidum. После эффективного лечения концентрация иммуноглобулинов постепенно снижается, но происходит это медленно, в отдельных случаях антитела могут обнаруживаться спустя год и более. От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков, причём предпочтительно применять производные пенициллина. На ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее. Более длительная терапия может понадобиться для пациентов, инфицированных больше года.

Зачем проводится анализ?

Повышение и понижение показателей

Для диагностики сифилиса. Для обследования всех беременных с профилактической целью (желательно на первом приеме гинеколога, при постановке на учет).

Когда назначается исследование? При симптомах сифилиса, таких как твердый шанкр на половых органах или в горле. Когда пациент лечится от другого ЗППП, например от гонореи. При ведении беременности, потому что сифилис может передаться развивающемуся плоду и даже убить его. Когда необходимо определить точную причину заболевания, если у пациента неспецифические симптомы, которые схожи с сифилисом (нейросифилисом). Если пациент инфицирован, он должен повторить анализ на сифилис через 3, 6, 12 и 24 месяца, чтобы убедиться, что лечение прошло успешно.

Результаты/Норма/Расшифровка анализа

Референсные значения (значения в норме)

Результат: отрицательно. Отношение S/CO (signall/cutoff): 0 — 0,9.

Положительный результат означает, что у пациента недавно приобретённое инфицирование. Вместе с тем отрицательный результат не всегда означает, что у пациента нет сифилиса.

Положительный результат

Положительный результат у ранее серонегативного пациента, а также значительный прирост титров в парных сыворотках, взятых с интервалом 7 дней, говорит о первичной инфекции. Обнаружение антител к трепонеме в крови новорождённого помогает подтвердить диагноз «врождённый сифилис». Кроме того, причиной положительного результата может быть третичный или скрытый сифилис.

Отрицательный результат

Отрицательный результат анализа может свидетельствовать об отсутствии инфицирования или слишком раннем его сроке, когда не выработался иммунный ответ. При этом отсутствие антител у младенца, родившегося от инфицированной матери, не исключает врождённого заболевания, поскольку на момент исследования антитела могут ещё не сформироваться.

Подготовка к сдаче анализа

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови

Что может повлиять на результат анализа?

Могут отмечаться ложноположительные результаты при таких заболеваниях, как ВИЧ, болезнь Лайма, малярия, системная красная волчанка, некоторые виды пневмоний, а также при наркомании и беременности. И многие другие соматические заболевания.

Важные замечания

Обследование на сифилис обязательно должно быть комплексным и включать в себя учёт анамнеза, клинической картины и подтверждение диагноза лабораторными данными.
Людям, ведущим активную сексуальную жизнь, необходимо консультироваться с врачом насчёт любых подозрительных высыпаний или болей в области половых органов.
Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность и своего сексуального партнера (партнершу), чтобы он (она) тоже прошел обследование и при необходимости лечение.
При сифилисе риск заражения другими заболеваниями, передающимися половым путем, повышается, в том числе риск заражения ВИЧ, который ведёт к СПИДу.

• Сифилис может также передаваться при переливании крови через загрязненные медицинские инструменты, поэтому перед госпитализацией в стационар очень важно проводить обследование.

Источник

— высокая чувствительность, которая, составляющая 90%;

— стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более);

— быстрота и удобство проведения диагностической реакции;

— возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала;

— возможность автоматизации всех этапов проведения реакции;

— небольшая стоимость диагностических наборов;

— возможность ранней диагностики инфекции;

— унифицированность и пригодность для массовых обследований;