Гемолитическая активность что это значит
Целью нашей работы явилось лабораторная оценка гемолитической активности клинических штаммов Enterobacter spp., роль которых в патологии человека не ясна.
Нами были изучены 105 клинических штаммов бактерий Enterobacter spp., среди которых 40% культур были изолированы от больных с желудочно-кишечными, 27,6% гнойно-воспалительными, 17,2% урологическими заболеваниями и 15,2% от практически здоровых людей.
Мы определяли у штаммов Enterobacter spp. способность к продукции α-, энтеро- и тиолзависимого гемолизина. В результате проведенных исследований мы выявили наличие α -гемолизина у 19 (18,1%) культур, среди которых 12 (63,2%) были выделены от больных кишечными, 4 (21,1%) — гнойно-воспалительными, 2 (10,4%)урологическими заболеваниями и 1 (5,3%) — от практически здоровых людей.
Наряду с α-гемолитической активностью у штаммов Enterobacter spp. была обнаружена способность продуцировать тиолзависимый гемолизин. Данный фактор оказался самым распространенным и выявлялся у 62 (59,1%) культур. Обращает на себя внимание тот факт, что из 62 культур, продуцирующих тиолзависимый гемолизин, 30 (48,4%) оказались изолированными от больных с кишечными, 17 (27,4%) — гнойно-воспалительными, 12 (19,4%) — урологическими заболеваниями. Среди штаммов, выделенных от здоровых людей, указанный признак встречался намного реже, и занимал область низких значений.
Наличие энтерогемолизинов была обнаружена лишь у 13 (12,4%) штаммов, среди которых 12 (92,3%) были изолированы при кишечных и 1 (7,7%) — гнойновоспалительных инфекциях. Среди Enterobacter spp., выделенных от здоровых людей, энтерогемолизинпродуцирующие штаммы обнаружены не были.
В процессе работы были отмечены различия в частоте обнаружения гемолитических свойств штаммов Enterobacter spp., выделенных от больных и здоровых людей. Установлено, что штаммы Enterobacter spp. , изолированные от больных, по сравнению с культурами, выделенными от здоровых людей, занимают область высоких значений как по частоте, так и по распространенности соответствующих признаков.
Таким образом, результаты наших исследований показали, что клинические штаммы Enterobacter spp., выделенные от больных, чаще обладают способностью продуцировать α-гемолизин, синтезировать тиолзависимый и энтерогемолизин, по сравнению со штаммами, изолированными от практически здоровых людей, что необходимо учитывать при оценке их этиологической значимости.
Источник
Гемолитическая активность что это значит
При инфекционных и аутоиммунных заболеваниях специфические антитела связывают антигены, что впоследствии может приводить к избыточному образованию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). ЦИК откладываются в стенках сосудов, преимущественно в капиллярах, что обуславливает симптоматику того или иного заболевания.
Для обнаружения ЦИК используется реакция связывания C1q-фактора комплемента. Фактор комплемента C1q является компонентом классического пути активации комплемента. Антитела, реагирующие с C1q, ускоряют формирование активного комплемента, что, в свою очередь, является причиной гипокомплементемии.
Снижение CH-50 отражает потребление факторов комплемента.
- Исследование IgG-иммунных комплексов методом связывания с C1q (С1q-IgG)
- Определение общей гемолитической способности комплемента (CH-50)
Общая гемолитическая активность комплемента, белки острой фазы воспаления, проба на общую гемолитическую активность комплемента.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Анализ на циркулирующие иммунные комплексы — ЦИК-C1q IgG — используется для количественного in vitro определения связывающихся с C1q циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), содержащих антитела класса IgG. Применяется при диагностике ревматических, аутоиммунных и инфекционных заболеваний, аллергий, гематологических и неопластических заболеваний. Это показатель развития различных воспалительных процессов в организме и показатель активности течения аутоиммунных заболеваний. Основные показания к применению: аутоиммунные заболевания, ревматизм, коллагенозы, вирусные бактериальные и грибковые заболевания, гломерулонефрит, артриты, аллергия.
Циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) присутствуют у многих людей, страдающих системной красной волчанкой (СКВ) и ревматоидным артритом (РА), особенно в тех случаях, когда есть осложнения в виде васкулитов. Существует зависимость (прямо пропорциональная) между активностью заболевания и уровнем ЦИК в крови. Для обнаружения ЦИК разработано несколько тестов, включая осаждение полиэтиленгликолем (ПЭГ), радиальную иммунодиффузию и клеточные исследования, однако какого-либо одного простого метода для обнаружения всех типов ЦИК пока не существует. Тем не менее показано, что достаточную информацию могут дать методы, основанные на иммунодетекции фрагментов комплемента, так как ЦИК, содержащие C1q и C3d, встречаются в тесной зависимости от клинической картины заболевания.
Фрагмент комплемента C1q проявляет наибольшую авидность к иммунным комплексам, имеющим размер от 19 до 27S. Отложения именно таких комплексов обычно обнаруживаются в поврежденных тканях при сывороточной болезни (прототип болезни иммунных комплексов).
Определение общей гемолитической способности комплемента (CH-50) позволяет выявить большинство нарушений этой системы. Нормальные результаты говорят о способности всех 11 компонентов классического пути активации комплемента и мембраноатакующего комплекса лизировать покрытые антителами эритроциты. При наследственной недостаточности компонентов от С1 до С8 показатель СН50 приближен к нулю, а при недостаточности С9 он составляет примерно половину от нормы. При приобретенной недостаточности комплемента показатели СН50 зависят от характера и тяжести основного заболевания. Анализ не выявляет недостаточности факторов альтернативного пути В или D, пропердина (глобулярный белок, важный компонент врождённого иммунитета) или МСЛ (маннансвязывающий лектин). При недостаточности факторов I или Н расходование С3 сохраняется и СН50 частично снижается.
При наследственном отеке Квинке СН50 во время приступов уменьшается из-за снижения уровня С4 и С2. Концентрацию С4 и СЗ (и почти всех других компонентов) в сыворотке крови количественно определяют с помощью специфических антител. Для наследственного отека Квинке характерны низкий уровень С4 и нормальная концентрация СЗ. С помощью антител можно определить и уровень ингибитора С1, хотя примерно в 15% случаев он остается нормальным. Поскольку С1 обладает эстеразной активностью, диагноз можно установить по увеличенной способности сыворотки больных гидролизировать синтетические эфиры. Нарушение функции комплемента подозревают во всех случаях рецидивирующего отека Квинке, аутоиммунных заболеваний, хронического нефрита или сегментарной липодистрофии, а также при частых гнойных инфекциях, диссеминации менингококковой или гонококковой инфекции и повторной бактериемии у больных любого возраста.
Для чего используется исследование?
- Для проведения дифференциального диагноза в кругу инфекционных, преимущественно бактериальных, и аутоиммунных заболеваний.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на наличие бактериальной инфекции,
- при подозрении на наличие аутоиммунного заболевания;
- при подозрении на наличие васкулита;
- при ряде атоиммунных патологий.
Что означают результаты?
1) Исследование IgG-иммунных комплексов методом связывания с C1q (С1q-IgG): менее 20 ru/ml.
2) Определение общей гемолитической способности комплемента (CH-50)
Общая гемолитическая способность (у.е./мл): 42 — 129 у.е./мл.
Общая гемолитическая способность (%): более 22 %.
Повышение уровня ЦИК IgG-C1q может указывать на наличие гломерулонефрита при системной красной волчанке, на наличие гипокомплементемического васкулита. Также исследование используется для мониторинга эффективности терапии при синдроме Гудпасчера.
Повышение CH50 может являться следствием наличия у пациента онкологического, инфекционного заболевания или язвенного колита.
Часто наблюдается снижение уровня CH50 при гепатите, нефрите, ассоциированном с системной красной волчанкой, циррозе, наследственном отеке Квинке, гломерулонефрите, реакции «трансплантат против хозяина» после проведения трансплантации почки.
Кто назначает исследование?
Ревматолог, инфекционист, врач общей практики, терапевт, иммунолог.
- Лапин С.В., Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний/ Издательство «Человек», СПб — 2010.
- Michael T. Lotze; Angus W. Thomson (2005). Measuring immunity: basic biology and clinical assessment. Academic Press. pp. 151–. ISBN 978-0-12-455900-4. Retrieved 3 December 2010.
- «Entrez Gene: C1QA complement component 1, q subcomponent, A chain».
Источник
Гемолитическая активность что это значит
Определение общей гемолитической способности комплемента (CH-50) – оценка функциональной активности одного из важнейших компонентов иммунной системы, основанная на определении содержания в сыворотке крови конечных продуктов его активации.
Общая гемолитическая активность комплемента, общая гемолитическая способность сыворотки, общая функциональная активность комплемента.
Total Hemolytic Complement (CH50), Complement CH50, Total Hemolytic Complement Activity.
у.е./мл (условных единиц в миллилитре).
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Комплемент представляет собой систему сывороточных белков, постоянно присутствующих в крови в неактивном состоянии. Белки системы комплемента обозначаются латинской буквой С и цифрой, а субъединицы белков или их активированные формы дополнительно маленькой латинской буквой (например С1q). Для активации системы комплемента требуется наличие в крови связанных с антигеном иммуноглобулинов классов G или М либо присутствие компонентов поверхностных структур клеток микроорганизмов. Взаимодействие определенных белков системы комплемента с этими веществами приводит к запуску каскада последовательных реакций между белками системы комплемента, в результате которых формируется так называемый мембраноатакующий комплекс. Он представляет собой полимерную белковую структуру из белков комплемента, которая по форме напоминает воронку или цилиндр. Мембраноатакующий комплекс встраивается в оболочку клетки-мишени и формирует в ней трансмембранные каналы, через которые внутрь клетки неконтролируемо поступает вода, вызывая её разрушение.
Система комплемента играет важную роль в уничтожении клеток патогенных микроорганизмов: бактерий, грибов, простейших, а также зараженных вирусами собственных клеток организма. Она способствует удалению образующихся в организме иммунных комплексов (связанных друг с другом антигенов и антител) и принимает участие в регуляции иммунного ответа. Благодаря наличию нескольких путей активации комплемента, эта система способна защищать организм не только от патогенов, к которым уже есть антитела, но и от тех, к которым еще не успел выработаться специфический иммунитет. Наследственные и приобретенные дефициты отдельных компонентов комплемента приводят к повышению частоты инфекционных заболеваний, прежде всего бактериальной этиологии. Повышенная склонность к развитию некоторых аутоиммунных заболеваний (системная красная волчанка и сходные синдромы, васкулиты, гломерулонефриты) при дефектах системы комплемента основана на недостаточном удалении из организма циркулирующих иммунных комплексов.
Вследствие того что итогом активации системы комплемента является образование мембраноатакующего комплекса, определение его содержания в сыворотке крови после запуска каскада системы комплемента позволяет оценить функциональную активность системы в целом. Долгое время активность комплемента определяли с помощью эритроцитов барана с фиксированными на них антителами. При добавлении исследуемой сыворотки в связи с наличием комплекса антиген-антитело запускался классический путь активации системы комплемента, который приводил к разрушению эритроцитов. Активность комплемента оценивали по количеству сыворотки, которое необходимо было добавить в смесь, чтобы вызвать разрушение 50% эритроцитов. Отсюда метод исследования получил название СН-50.
Однако описанный выше метод является косвенной оценкой образования мембраноатакующих комплексов, разрушающих эритроциты. Гораздо более точным и чувствительным является метод определения структур мембраноатакующего комплекса с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Для исследования используется раствор с содержащимися готовыми иммунными комплексами, который играет роль активатора. При добавлении исследуемой сыворотки он запускает каскад активации комплемента по классическому пути, в результате которого образуются молекулы мембраноатакующего комплекса. Полученным раствором заполняют планшет, в лунках которого сорбированы антитела к МАК. При формировании комплекса МАК-антитело специальный фермент, добавленный в реакционную смесь, изменяет её окраску. При этом интенсивность цвета пропорциональна концентрации образовавшихся мембраноатакующих комплексов в исследуемой сыворотке. Интенсивность окраски измеряется специальным прибором, который переводит параметры световой волны в цифры, соответствующие концентрации МАК. Используя стандартизованные шкалы перевода, полученные результаты записывают в единицах эквивалента СН50 в миллилитре, что делает интерпретацию результатов более понятной.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики иммунодефицитных состояний, обусловленных наследственными дефектами системы комплемента;
- для определения активности некоторых аутоиммунных заболеваний, сопровождающихся повышенным потреблением компонентов комплемента.
Когда назначается исследование?
При диагностике врождённых иммунодефицитов в качестве скрининга на дефицит отдельных белков системы комплемента, при рецидивирующих бактериальных инфекциях;
при мониторинге некоторых аутоиммунных заболеваний, обусловленных избытком и отложением в тканях иммунных комплексов.
Что означают результаты?
Референсные значения: 42 — 129 у.е./мл.
Снижение СН50 наблюдается обычно при дефиците или повышенном потреблении отдельных компонентов классического пути активации комплемента.
- Данный тест является скрининговым, он позволяет исключить или подтвердить функциональные нарушения системы комплемента. При сниженных значениях СН50 целесообразно провести более углубленное обследование – специальные иммунохимические и функциональные тесты для выявления каждого компонента комплемента. Объем дообследования и его необходимость согласовывается с доктором.
- Данный тест оценивает активность исключительно классического пути активации комплемента. Для оценки альтернативного или лектинового пути необходимо проводить другие лабораторные тесты.
- Определение функциональной активности основных путей системы комплемента
С4 компонент комплемента
С3 компонент комплемента
Определение активности маннан-связывающего лектина
Определение уровня MASP-2
Предрасположенность к инфекционным заболеваниям. Недостаточность маннан-связывающего лектина (комплексное генетическое исследование, направленное на поиск частых мутаций гена MBL2, который кодирует маннан-связывающий лектин)
Кто назначает исследование?
Иммунолог, ревматолог, терапевт, педиатр, врач общей практики.
- Henry’s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri : Elsevier, 2016. Pages 941-942.
A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 9th Edition, by Frances Fischbach, Marshall B. Dunning III. Wolters Kluwer Health, 2015. Pages 600-602.
Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. – T. II / Под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. С. 21-25.
Аллергология и иммунология: национальное руководство / под ред. Р. М. Хаитова, Н. И. Ильиной. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. С. 374-378.
Источник
