- Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
- День первый
- День второй
- День третий
- День четвертый
- День пятый
- Качество эмбрионов при ЭКО
- Классификация эмбрионов при ЭКО
- Что такое качество ооцита?
- Плохое качество яйцеклеток при ЭКО – причины
- Классификация эмбрионов по качеству ЭКО
- Дробление — с первых по 4 сутки развития.
- Компактизация до стадии морулы – с третих по пятые сутки развития.
- Образование и рост бластоцисты – с четвертых по седьмые сутки развития.
- Как улучшить качество эмбрионов при ЭКО?
Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, однако именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
Проведение манипуляций с человеческими эмбрионами, имеющими микроскопические размеры – это сложная область медицины. Поэтому в процессе работы врачи используют сложную терминологию. В данной статье Апрышко Валентина Петровна, заведующая лабораторией эмбриологии одной из московских клиник, расскажет о методах и критериях оценки качества эмбрионов.
Самостоятельно принимать решения, связанные с выбором эмбриона или даты его переноса в матку могут только специалисты-эмбриологи. Однако после прочтения данного материала вы начнете понимать медицинские обозначения типа «8С».
День первый
Сразу после оплодотворения доктор проверяет признаки того, что процедура ИКСИ, ПИКСИ или ЭКО проходит успешно. Для этого он смотрит, как выглядят пронуклеусы, и оценивает их:
- наличие;
- количество;
- внутреннюю структуру;
- симметричность;
- внешний вид.
Пронуклеусы – это ядра половых клеток (мужских и женских), которые еще не слились. Изучая их вид, можно оценивать перспективы, качество и жизнедеятельность будущих эмбрионов.
- пронуклеусов должно быть два;
- они должны располагаться рядом;
- их размеры должны быть одинаковыми;
- внутри должны визуализироваться «ядрышки» (пронуклеоли);
- «ядрышки» должны иметь правильное расположение и количество.
На данном этапе развития эмбрионов может формироваться множество патологий, которые ведут к их гибели. Например:
- присутствие одного пронуклеуса вместо двух (оплодотворение не состоится);
- наличие трех пронуклеусов (эмбрион нежизнеспособен, так как будет иметь тройной хромосомный набор).
Плохие эмбрионы сразу отбраковывают. Нет смысла их пересаживать. Даже если они не погибают на этапе культивации, организм женщины сам отторгает такие зародыши. В результате если беременность наступает, она очень быстро прерывается. Это происходит уже в первые недели гестации.
Гестация, гестационный возраст новорожденного (от лат. gestatio ношение) — количество полных недель беременности, прошедших между первыми сутками последней менструации роженицы и моментом перерезания пуповины во время родов.
День второй
На второй день культивации клетка делится на две. Образуются бластомеры.
Бластоме?ры — клетки эмбрионов на этапе дробления. Оплодотворенная яйцеклетка делится на две дочерние клетки, называемые бластомерами. Каждый бластомер делится на две новые дочерние клетки, которые также получают название бластомеров.
Критериями качества эмбриона на данном этапе являются его:
- размеры;
- форма;
- степень фрагментации (объем, который внутри эмбриона занимают безъядерные элементы цитоплазмы);
Чем больше внутри эмбриона бластомеров и чем меньше степень фрагментации, тем более качественным он считается. Такой зародыш имеет большой потенциал к дальнейшему нормальному развитию.
Многие эмбриологи используют классификацию, отражающую качество эмбрионов с помощью четырех букв латинского алфавита. Вот эта классификация:
- А – безъядерных фрагментов нет, высококачественный эмбрион;
- В – фрагментация до 20%, эмбрион среднего качества;
- С – содержание безъядерных элементов цитоплазмы больше 20%, но не достигает 50%, эмбрион удовлетворительного качества;
- D – количество ануклеарных (безъядерных) фрагментов цитоплазмы превышает 50%, такой эмбрион считается некачественным.
Также в этой классификации используются цифры, которые отражают количество бластомеров. Чем их больше, тем продукт слияния мужской и женской половых клеток считается лучше. Например, эмбрион «4В» оценивается более высоко, чем «3С». Ведь в нем больше бластомеров и меньше фрагментация.
День третий
Нормальный эмбрион на третий день развития имеет от 7 до 9 бластомеров. Он уже начинает выполнять заложенную в нем генетическую программу.
На данном этапе многие зародыши прекращают свое развитие. Это происходит по причине наличия дефектов генетического материала.
«Блок развития» – так называют эмбриологи явление, которое обеспечивает естественный отбор. Процесс размножения весьма сложен. В ДНК часто случаются поломки. «Поломанные» эмбрионы останавливаются в развитии.
Оценка их качества происходит точно так же, как на второй день. Используется аналогичная классификация. Только бластомеров становится больше. Поэтому описываются они, например, как 8А.
День четвертый
Если бы развитие эмбриона происходило в естественных условиях, он попал бы в полость матки на четвертый день после оплодотворения. До этого времени он находится в маточной трубе.
На четвертый день зародыш состоит из 10-16 бластомеров. Он становится более компактным – занимает небольшой объем относительно количества клеток. Его поверхность выглядит более гладкой, чем на третий день.
Морула – так называется стадия развития эмбриона на данном этапе. В переводе это означает «тутовая ягода». Так эмбриологи назвали его именно за внешнее сходство с этой ягодой.
Заканчивается данная стадия кавитацией. Так называется процесс образования полости внутри эмбриона.
День пятый
На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.
В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:
- Трофобласт. Находится снаружи. Эта часть эмбриона отвечает за его внедрение (имплантацию) в слизистую оболочку матки. Из него будет развиваться плацента и прочие внезародышевые оболочки.
- Эмбриобласт. Находится внутри. Из этих клеток в дальнейшем сформируются органы и ткани плода.
Именно на этой стадии в большинстве случаев врачи пересаживают эмбрион в матку женщины. Также их можно замораживать. Это делают, чтобы сохранить «лишние» эмбрионы на следующий цикл.
Весь эмбрион окружен блестящей оболочкой. После переноса эта оболочка разрывается. Бластоциста выходит наружу и встраивается в стенку матки. Этот процесс называется hatching, что означает «вылупление».
Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.
На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:
- размер внутренней полости;
- степень проникновения эмбриона за оболочку;
- количество и плотность клеток.
Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.
Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:
- 1 – полость внутри эмбриона менее 50% (ранняя бластоциста);
- 2 – полость внутри эмбриона более 50% от его объема;
- 3 – полость занимает весь объем эмбриона;
- 4 – полость увеличивается, а оболочка эмбриона становится тоньше (расширенная бластоциста);
- 5 – трофэктодерма (наружный слой бластоцисты) проникает сквозь блестящую оболочку;
- 6 – бластоциста «вылупляется» и покидает оболочку.
Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.
Данный параметр отражается буквами:
- А – плотно упакованный «футбольный мяч» с большим количеством клеток;
- В – среднее количество клеток внутри бластоцисты;
- С – малое количество клеток.
Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.
Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:
- А – много клеток;
- В – среднее количество клеток;
- С – мало клеток.
Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.
Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.
Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.
Источник
Качество эмбрионов при ЭКО
Качество эмбрионов – это ключевой параметр, определяющий успешное прохождение ЭКО. Определение качества производится специалистами-эмбриологами при помощи визуального исследования под микроскопом.
В настоящее время приняты четыре класса качества эмбрионов на стадии дробления (по 3 дня развития)
- Класс 1 (А). Отличное качество.
Для этой категории характерны следующие параметры- Максимальная скорость дробления.
- Полное отсутствие безъядерных фрагментов.
- Правильная форма бластомеров, наличие четких контуров.
- Класс 2 (В). Хорошее качество.
«Хорошими» считаются эмбрионы, в которых неравные бластомеры или отдельные неровные фрагменты цитоплазмы составляют не более 10% от общего объема. - Класс 3 (С). Удовлетворительное качество.
Фрагментация составляет от 10% до 30% от общего объема. Отсутствует задержка в развитии (дроблении) эмбриона; допустимо наличие 1 бластомера объемом не выше чем в 2 раза любого другого. - Класс 4 (D). Неудовлетворительное качество.
Наличие любого из следующих факторов: Фрагментация составляет свыше 50% от общего объема; наличие бластомеров с 2 ядрами; выраженная неравность бластомеров; сильная задержка или блок развития эмбриона.
Данные критерии являются достаточно условными. При определении качества исследуется набор параметров – количество клеток, их расположение, фрагментация, толщина оболочки.
Качество эмбрионов при ЭКО определяется через 48 часов после оплодотворения яйцеклетки. К тому времени должно сформироваться минимум две клетки (оптимально четыре). Через 72 часа клеток должно быть минимум шесть (оптимально восемь). Чем выше качество, тем выше у эмбриона шансы на выживание.
Считается, что эмбрионы отличного и высокого качества имеют высокую вероятность успешной имплантации. При этом необходимо отметить, что существует целый ряд параметров, не поддающихся лабораторным измерениям и существенно влияющих на способность эмбрионов к имплантации.
В клинике «Дети из пробирки» качество эмбрионов определяют специалисты-эмбриологи высшей квалификации. Правильный выбор эмбриона означает максимальную вероятность беременности.
Вся информация носит ознакомительный характер. Если у вас возникли проблемы со здоровьем, то необходима консультация специалиста.
Источник
Классификация эмбрионов при ЭКО
Несмотря на старания ученых и практикующих репродуктологов, до сих пор не удается приблизиться к тому, чтобы практическая каждая попытка экстракорпорального оплодотворения заканчивалась родами. Поэтому возникает резонный вопрос – на что влияет качество эмбрионов при ЭКО, как его оценить, какие предпринять дальнейшие действия и процедуры.
Что такое качество ооцита?
Сразу после того, как получены женские и мужские половые клетки, начинается оценка их качества по морфологическим признакам. Это важно для того, чтобы эмбриолог принял правильное решение о методе оплодотворения – ЭКО или интрацитоплазматическая инъекция (ИКСИ).
Ооцит (женская половая клетка) может иметь разную степень готовности к оплодотворению. Поэтому различают следующие виды яйцеклеток – незрелые, зрелые, дегенеративные и разрушенные. Класс ооцита определяют по состоянию генетического материала в ядре клетки. Зрелые яйцеклетки, которые можно оплодотворять, имеют первое полярное тельце (такие клетки обозначаются М II).
Незрелые яйцеклетки оплодотворению не подлежат. Обычно процесс созревания женской гаметы прерывается на более ранней стадии мейотического деления вследствие внутренних или внешних причин, а также в результате неправильного введения триггера (например, хорионического гонадотропина в цикле ЭКО).
Плохое качество яйцеклеток при ЭКО – причины
Качество эмбрионов при ЭКО, с одной стороны, определяется качеством генетического материала яйцеклетки, а с другой – качеством материала сперматозоида. Причинами плохого состояния женских половых клеток могут быть следующие факторы:
- неблагоприятная экологическая обстановка – загрязнение воздуха выхлопными газами автомобилей, выбросами предприятий;
- токсическое воздействие, которое обусловлено курением, злоупотреблением спиртными напитками, вдыханием паров бытовой химии, паров бензина и других ядовитых веществ;
- гинекологические заболевания, особенно приводящие к гормональному дисбалансу;
- сниженный или неадекватно реагирующий иммунитет;
- длительный или сверхсильный стресс;
- синдром хронической усталости;
- ожирение;
- несбалансированное питание, которое приводит к дефициту витаминов и минералов;
- повышенный радиоактивный фон;
- частые перелеты, которые рассинхронизируют процессы, протекающие в женском организме.
Помимо внешних причин, которые рассмотрены выше, на исход беременности влияет также качество эмбриона, а не только половых клеток, из которых он состоит. Это так называемые эмбриональные факторы, роль которых высока не только при искусственном оплодотворении, но и при естественном зачатии. Так, почти 50% самостоятельных зачатий завершаются прерыванием, при этом женщина даже не догадывается об этом состоянии ввиду отсутствия задержки месячных. В большинстве случаев причиной таких сверхранних потерь беременности являются хромосомные патологии эмбриона. Как правило, они не совместимы с жизнью, поэтому и происходит их естественная гибель.
В рамках ЭКО выявить подобные состояния помогает предимплантационная диагностика, при которой исследуется хромосомный набор эмбриона перед его введением в полость матки. Проводится не всем парам, а только при наличии показаний.
Так же при развитии эмбрион может остановиться на любой стадии оплодотворения. Одной из причин может быть иссечение внутренних запасов женской гаметы, а образовавшийся эмбрион не может еще продуцировать питательные вещества, поэтому погибает.
Классификация эмбрионов по качеству ЭКО
Классификация эмбрионов по качеству при ЭКО основана на оценке ряда факторов:
- внешний вид наличие или отсутствие блестящей оболочки, ее форма и дефекты оболчки;
- определенное количество клеток (бластомеров), которое зависит от суток жизни эмбриона и скорости его дробления;
- выраженность фрагментирования – показатель фрагментации до 25% расценивается как нормальный;
- размер клеток, которые должны быть одинаковыми и сохранять правильную форму;
- состояние цитоплазмы – должны отсутствовать всевозможные патологические включения;
Традиционно принято выделять несколько вида эмбрионов при ЭКО с учетом времени их развития. Однако это не единственный критерий, важный при применении методов вспомогательной репродукции. Существует еще классификация эмбрионов по качеству при ЭКО, которая также зависит от «возраста» зародыша.
Формирование зиготы- первые сутки развития
Примерно через 16-20 часов после соединения яйцеклетки со сперматозоидом инициируется эмбриональное развитие, о чем говорит появление пронуклеусов (шифруется в протоколе ЭКО как pN). Эти структуры соответствуют генетическому материалы полученному от родителей, в норме их два, один от матери и один от отца.
качества эмбрионов при ЭКО в первые сутки выглядит следующим образом:
- Отсутствие пронуклеусов, с биологической точки зрения, говорит о том, что запаздывает развитие, нет ининциации на клеточное деление или оплодотворение не произошло.
- Появиление 1 пронуклиуса, может сигнализировать о более раннем или позднем начале инициации эмбрионального развития, а так же .
- Появление 2 пронуклиусов- нормальное оплодотворение.
- Появление более 2 пронуклеусов Это является признаком неправильного оплодотворения. Такие зиготы не используются в рамках методов вспомогательной репродукции и подлежат утилизации.
Дробление — с первых по 4 сутки развития.
В последующие 5-7 суток активно протекают процессы клеточного деления. Оценка качества эмбрионов при ЭКО с занесением в таблицу- эмбриолист данных производится на , 3-и 5-е и 6-е сутки после слияния женской и мужской половой клетки. Изучению подлежат два основных критерия:
- количество клеток, которые называются бластомерами
- количество фрагментации.
В классификации эмбрионов при ЭКО используются буквенные и числовые обозначения. Так, число указывает на количество клеток (бластомеров), а буква латинского алфавита – на их качество:
.
Хорошими эмбрионами на третьи сутки развития считаются те, которые имеют более 5 бластомеров, качество которых соответствует категории А и В.
В оценке «трехдневок» один из главных критериев – это степень фрагментации эмбрионального материала. Эта классификация предполагает выделение 4 подтипов:
- Тип А – это эмбрионы самого лучшего качества. Их клетки быстро делятся и имеют округлую форму.
- Тип В – качество этих эмбрионов чуть хуже. На это указывает неровность формы клеток бластоцисты и незначительная выраженность фрагментации.
- Тип С – фрагментация имеется у каждого пятого эмбриона – каждого второго эмбриона.
- Тип Д – практически каждый эмбрион фрагментирован (количество фрагментаций более 50%).
Начиная с 3 суток Эмбрионы можно заморозить, чтобы использовать при последующих ЭКО. Криоконсервация позволяет проводить подсадку в цикле без стимуляции яичников гормональными препаратами, а это повышает шансы успешного развития беременности и последующих родов.
Компактизация до стадии морулы – с третих по пятые сутки развития.
С конца третьих суток между клетками зародыша постепенно стираются границы. Этот процесс называется компактизацией и знаменует начало формирования морулы.
Оценка состояния эмбриона на данном этапе развития не используются, т.к. малоинформативны. Единственное, что можно оценить – есть компактизация или нет.
Образование и рост бластоцисты – с четвертых по седьмые сутки развития.
С 4-х суток начинает формироваться бластоциста. Классификация эмбрионов выглядит несколько иным образом. В расчет берутся следующие критерии:
- стадия роста бластоцисты (шифруется от 1 до 5);
- статус внутренней клеточной массы, которая является будущим плодом (оценивается от «А» до «С»);
- состояние окружающих клеток и называются и трофоэктодормой (кодируется от « А» до « C»).
Расшифровка оценки эмбрионов при ЭКО в этом случае такова:
- 1 ранняя бластоциста, полость бластоцисты меньше половины эмбриона;
- 2 средняя бластоциста, полость бластоцисты больше половины эмбриона;
- 3 большая бластоциста роста, полость бластоцисты заполняет весь эмбрион;
- 4 бластоциста в стадии предхетчинга, то есть разрушение наружной оболочки, который необходим для имплантации;
- 5 бластоциста на этапе хетчинга, что говорит о ее готовности к имплантации – внедрению в слизистую матки;
- 6 бластоциста, которая вышла из оболочки (состоявшийся хетчинг).
Начиная со стадии бластоцисты, развитие эмбриона должна уже осуществляться в матке. Для этого должен пройти хетчинг, который условно можно сравнить с процессом «вылупления из яйца», когда разрушается наружная оболочка, выполняющая роль «скорлупы».
Как улучшить качество эмбрионов при ЭКО?
Чтобы еще до вступления в программу ЭКО улучшить качество будущих эмбрионов, пара проходит расширенную диагностику. При выявлении различных отклонений от нормы проводится их коррекция. Помимо этого, назначается предгравидарная подготовка, в которую входят препараты фолиевой кислоты, омега-3 кислоты, йод и другие минералы, витамины.
В репродуктивном центре «СМ-Клиника» оказывается полный спектр услуг в рамках методов вспомогательной репродукции, подготовки к предстоящей беременности и ее ведению. В клинике внедрены современные протоколы, что позволяет добиваться высоких показателей эффективности ЭКО. Записывайтесь на прием и становитесь родителями здоровых малышей!
Источник