Что значит выявлены специфические фрагменты днк

ДНК-фрагментация сперматозоидов как фактор мужского бесплодия

Сложным термином «фрагментация ДНК сперматозоидов» в медицине называют дефект генетического материала, который содержится в ядре мужской половой клетки. Это серьезное нарушение, и с ним сложно справиться. Если в сперме много сперматозоидов с таким дефектом – она теряет фертильность, т. е. не может оплодотворить яйцеклетку. Поэтому ДНК-фрагментация выступает одной из причин мужского бесплодия, и, несмотря на серьезность проблемы, с ней необходимо бороться с помощью определенного лечения.

Норма ДНК-фрагментации сперматозоидов

Фрагментация – это обрывки молекул ДНК, которые образуются, когда нарушается целостность структуры нуклеиновых цепочек. В сперме может содержаться разное количество сперматозоидов с таким нарушением. И это нормально, поскольку в организме действует процесс отбраковки, за счет которого дефектные клетки удаляются, но часть их все же остается. Поэтому в медицине установлена норма ДНК-фрагментации сперматозоидов. Она составляет 15% – пороговое значение, при превышении которого говорят о наличии отклонений.

Как определяют

Чтобы определить индекс фрагментации ДНК сперматозоидов, прибегают к специальным тестам. Для них используют сперму, которую берут как в случае со спермограммой (путем мастурбации). В течение 3-5 дней до анализа мужчине необходимо воздерживаться:

• от половых контактов;
• алкоголя;
• бани и сауны;
• подогрева сиденья в автомобиле.

За 2 недели до исследования нужно отказаться от антибиотиков. Еще в этот период у мужчины не должно быть заболеваний с повышенной температурой.

Основные методы определения фрагментации ДНК сперматозоидов:

• TUNEL-тест. В основе метода лежит оптический эффект. В сперму добавляют энзим, который встраивается в поврежденные части цепочек. Дефектные клетки подсвечиваются или окрашиваются, и их можно подсчитать. Получившееся число делят на общее количество спермиев. В результате и получается процентное соотношение.
• HALOSPERM-тест, или метод SCD. В отличие от предыдущего предполагает подсчет не поврежденных, а здоровых клеток. Метод обладает высокой чувствительностью.
• SCSA-тест. Применяется лазерный луч, под действием которого поврежденные клетки приобретают цвет: красный – при серьезных дефектах, желтый – при незначительных, зеленый – повреждений нет. Пороговое значение – 20%.

Анализ рекомендуют сдавать при невозможности зачать, повторяющемся невынашивании беременности и неудачных попытках ЭКО, подготовке к ЭКО и ИКСИ, а также при обнаружении отклонений в спермограмме.

Расшифровка результатов проводится по-разному в зависимости от вида теста. Для TUNEL установлены следующие значения:

• до 15% – нормальное состояние;
• 15-30% – низкая степень нарушений ДНК, есть затруднения с зачатием;
• 30-50% – зачатие естественным путем маловероятно, но прогнозы для ЭКО хорошие;
• 50-60% – низкая вероятность зачатия даже при ЭКО;
• более 60% – зачатие исследуемой спермой маловероятно, поэтому рекомендуется прибегнуть к использованию донорской спермы.

HALOSPERM-тест имеет свои показатели:

• до 20% – высокие шансы естественного зачатия;
• 20-30% – при стабильной вероятности зачатия повышен риск выкидыша и замершей беременности;
• 30-50% – оплодотворение маловероятно, поэтому рекомендовано ЭКО;
• 50-60% – зачатие возможно при проведении процедуры ИКСИ;
• более 60% – опять же рекомендовано использовать донорскую сперму.

Причины и опасность высокой ДНК-фрагментации

Нуклеиновые цепочки в составе ДНК могут разрываться под влиянием внутренних или внешних факторов. Все причины можно разделить на 2 группы:

• Сбой в механизме отбраковки, из-за чего дефектные клетки не выводятся естественным путем. В результате их количество в сперме резко возрастает, и появляются проблемы с зачатием.
• Нарушение процесса созревания сперматозоидов. Из-за этого молекула ДНК теряет свою стабильность и проще разрывается.

К указанным процессам могут приводить разные факторы:

• химиотерапия и влияние рентгеновского излучения;
• нарушение баланса между образованием и ликвидацией свободных радикалов (окислительный стресс);
• проживание в неблагоприятной экологической обстановке;
• варикоцеле;
• сильные стрессы и психоэмоциональные нарушения;
• воздействие высокой температуры;
• злоупотребление курением и алкоголем;
• хронические инфекционные и воспалительные процессы в организме.

В первую очередь повышенная фрагментация ДНК сперматозоидов влияет на репродуктивную функцию. Чем больше спермиев с дефектом генетического материала, тем меньше вероятность, что зачатие произойдет естественным путем. Если оно случится, то высок риск, что у ребенка могут быть генетические нарушения и онкологические заболевания.

Лечение ДНК-фрагментации сперматозоидов

При выявлении повышенной фрагментации ДНК спермиев врач может назначить ряд дополнительных исследований, чтобы найти причину нарушения. Улучшить ситуацию может отказ от вредных привычек, излечение от инфекционного заболевания, смена рода деятельности, ограждение от стрессов.

Если причина – варикоцеле, его устраняют хирургическим путем. Дополнительно мужчине может назначаться антиоксидантная терапия и рекомбинантный (человеческий) фолликулостимулирующий гормон (ФСГ). Лечение подбирает врач, исходя из особенностей каждого конкретного случая. Поэтому при проблемах с зачатием в первую очередь необходимо обратиться к специалисту. Клиника Dr. AkNer приглашает вас на консультацию к урологу и андрологу. Записывайтесь на прием в форме на сайте или по контактному телефону +7 (495) 098-03-03.

Источник

Что значит выявлены специфические фрагменты днк

Исследование позволяет выявить концентрацию ДНК Ureaplasma parvum в биологическом материале. Данный вид микроорганизмов относится к группе условно-патогенных (УПМ), присутствует в микрофлоре 50-75 % взрослого населения, однако при снижении иммунитета или присоединении других инфекций активно размножается, приводя к развитию дисбиоза, а затем воспалительного процесса. Уреаплазмы обладают невысокой иммуногенностью, что затрудняет обнаружение специфических антител к ним в сыворотке крови, поэтому обнаружение генетического материала (ДНК) – наиболее чувствительный метод диагностики. Определение вида уреаплазмы имеет значение при выборе оптимальной тактики лечения.

Возбудитель уреаплазмоза, уреаплазма.

Ureaplasma parvum, DNA.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

ГЭ/мл (геномный эквивалент на миллилитр биоматериала).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Первая порция утренней мочи, соскоб из прямой кишки, соскоб урогенитальный.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после её окончания.
• Мужчинам — не мочиться в течение 3 часов до взятия урогенитального мазка или сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Ureaplasma parvum (прежде определялась как «биовар parvo») являются разновидностью уреаплазм – условно-патогенных микроорганизмов, способных паразитировать на мембране сперматозоидов и эпителия слизистой оболочки мочеполовых органов. Уреаплазмы передаются преимущественно половым путем, хотя возможен контактно-бытовой, а также вертикальный способ – от больной матери к ребенку во время беременности или родов. Источник заражения – больной уреаплазменной инфекцией или бессимптомный носитель Ureaplasma parvum (уреаплазма парвум). После инфицирования развитие инфекции происходит не во всех случаях. Ему способствуют различные иммунодефициты, нарушение факторов местной защиты, в том числе дисбиоз влагалища у женщин или хронический простатит у мужчин, сопутствующие инфекции (хламидиоз, гонорея, бактериальный вагиноз и т. д.).

Инкубационный период составляет 2-5 недель. Симптомы уреаплазменной инфекции могут быть слабо выраженными или вообще отсутствовать (характерно для женщин). У мужчин уреаплазма парвум может быть причиной воспаления уретры (негонококковый уретрит), мочевого пузыря (цистит), простаты (простатит), поражения яичек (орхит) и их придатков (эпидидимит), нарушения состава спермы (снижение подвижности и количества сперматозоидов – что грозит бесплодием), а также реактивных артритов и мочекаменной болезни. У женщин уреаплазма парвум способна вызывать воспаление влагалища (вагинит), шейки матки (цервицит), а при ослаблении иммунитета – воспаление матки (эндометрит) и ее придатков (аднексит), что может приводить к внематочной беременности или бесплодию. Кроме того, уреаплазма парвум у беременных может быть причиной выкидышей, воспаления плодных оболочек, рождения детей с низкой массой тела, а также причиной развития бронхолегочных заболеваний (воспаления легких, дисплазии), бактериемии и менингита у новорождённых.

В качестве причины воспалительных заболеваний мочеполовой системы Ureaplasma parvum рассматривают в том случае, если при лабораторном исследовании не выявляются другие патогенные микроорганизмы, способные вызвать эти заболевания. Дифференцировать Ureaplasma parvum от другого вида уреаплазм – U. urealyticum, – можно только с помощью молекулярно-генетических методов, в том числе и полимеразной цепной реакции. Определение вида уреаплазмы имеет значение при выборе оптимальной тактики лечения пациента.

Для чего используется исследование?

• Дифференцирование U. parvum от другого вида уреаплазм – U. urealyticum.
• Количественный анализ микроорганизмов данного вида.
• Чтобы установить причину хронических воспалительных заболеваний мочеполовой системы.
• Для дифференциальной диагностики заболеваний, вызванных половыми инфекциями и протекающих со сходными симптомами: хламидиоза, гонореи, микоплазменной инфекции (наряду с другими исследованиями).
• Чтобы оценить эффективность антибактериальной терапии.
• Для профилактического обследования.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на уреаплазменную инфекцию и уреаплазмоз, в том числе после случайных половых контактов и при симптомах воспаления мочеполовой системы.
• При планировании беременности (обоим супругам).
• При бесплодии или невынашивании беременности.
• При внематочной беременности.
• При необходимости оценить эффективность антибактериальной терапии (через 1 месяц после лечения).

Что означают результаты?

Референсные значения: не более 1*10^5 ГЭ/мл.

Количество условно патогенных микроорганизмов на бланке с результатом указано в геномных эквивалентах на миллилитр биоматериала (ГЭ/мл).

Геномный эквивалент – это «объем» генетического материала, соответствующий одному геному бактерии, гриба или простейшего. Если в бактериологических исследованиях принято считать, что одной клетке возбудителя соответствует КОЕ (колониеобразующая единица), то в молекулярно-биологических исследованиях похожей единицей является ГЭ.

Выявленное методом ПЦР количество ГЭ напрямую отражает количество клеток возбудителя, в то время как КОЕ косвенно отражают количество возбудителя в образце и в значительной степени зависят от особенностей исполнения бактериологического исследования.

• Обнаружение ДНК Ureaplasma parvum в биоматериале может свидетельствовать о том, что этот микроорганизм вызвал воспалительные заболевания органов мочеполовой системы, только при наличии симптомов воспаления и при отсутствии других патогенных микроорганизмов (хламидий, микоплазм, гонококков).
• Выявление ДНК Ureaplasma parvum при отсутствии симптомов воспалительных заболеваний мочеполовой системы расценивается как носительство.

• Отсутствие ДНК Ureaplasma parvum в исследуемом биоматериале при наличии симптомов воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы свидетельствует о том, что данный возбудитель не является причиной этих заболеваний.

Критерии постановки диагноза:

• выявление ДНК условно-патогенных микроорганизмов (УПМ) в концентрации выше 10 5 ГЭ/мл (порог клинической значимости, что соответствует 10 4 КОЕ/мл);
• клинические и лабораторные признаки воспалительного процесса;
• отягощенный анамнез (невынашивание, преждевременные роды и т.д.).

При наличии специфических клинических проявлений анализ можно дополнить исследованиями на микоплазмы (Флороценоз), сифилис, вирусы герпеса, ВПЧ.

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, уролог, венеролог, педиатр-неонатолог, инфекционист.

Источник

Анализ на выявление уреаплазмоза

Уреаплазмоз – инфекционное заболевание мочеполовой системы, вызванное уреаплазма парвум и др., симптомы которого могут проявляться по-разному.

Симптомы уреаплазмоза

Проявления инфекции, вызванной уреаплазма парвум и др. могут быть сходными у мужчин и женщин. Часто наличие уреаплазмы сочетается с другими половыми инфекциями, поэтому симптомы могут изменяться под влиянием прочих возбудителей.

Уреаплазма: симптомы у мужчин

У мужчин признаками уреаплазмоза бывают хронические воспалительные процессы в простате (простатит), придатках (эпидидимит) или мочеиспускательном канале. Часто при этом присутствуют выделения из уретры, зуд и жжение в этой области, боли внизу живота.

При инфекции, которую вызвала уреаплазма, симптомы у мужчин могут также проявляться бесплодием. Уреаплазма парвум и др. способна проникать в сперматозоиды, нарушая их подвижность и снижая шансы на оплодотворение яйцеклетки.

Уреаплазма: симптомы у женщин

Проявления уреаплазмоза могут быть следующими:

• Выделения из половых путей;

• Неприятные ощущения при половом контакте;

• Боли внизу живота, а также в области уретры;

• Зуд в области мочеиспускательного канала;

• Частые воспаления органов мочеполовой системы и слизистых оболочек (вульвовагиниты, уретриты и др.).

У беременных женщин при инфекции, которую вызвала уреаплазма, симптомы и осложнения могут варьировать от хронических воспалений мочеполовых органов, до преждевременных родов или инфицирования плода. Поэтому активная уреаплазма при беременности повышает риски для матери и будущего ребёнка.

Лечение уреаплазмоза

При обнаружении уреаплазмы лечение проводится в случае, если микроб является причиной хронического воспаления, бесплодия и т.д. Если причиной заболевания явилась уреплазма, лечение назначается с применением антибиотиков. Выбор антибиотика должен осуществлять доктор, так как самолечение уреаплазмоза часто не только не приносит нужного результата, но и может привести к развитию устойчивости микроба к антибиотику. Так, за последние несколько лет нарастает число устойчивых к тетрациклину штаммов уреаплазма уреалитикум и парвум.

Особое значение имеет лечение уреаплазмы (парвум, уреалитикум) у мужчин и женщин при планировании беременности. Решение о лечении уреаплазмы парвум и др. при наступившей беременности принимается с учётом её срока, а также после тщательного взвешивания возможных рисков для ребёнка и матери со стороны уреаплазмы и антибиотикотерапии. Обычно лечение уреаплазмы при беременности стараются проводить на более поздних сроках (после 20 недели), когда влияние антибиотиков на развитие плода становится минимальным.

Диагностика уреаплазмоза

Чтобы поставить диагноз, необходимо сочетание клинической картины и лабораторных данных. Нужно помнить, что уреаплазма парвум и уреалитикум являются условно-патогенными микробами, поэтому не всегда можно устанавливать диагноз уреаплазмоза, опираясь только на результаты анализов. Точно также нельзя точно установить присутствие микробов Ureaplasma urealyticum, parvum и развитие заболевания только на основе клинических данных, без объективного лабораторного подтверждения.

Посев на уреаплазму парвум и уреалитикум у мужчин и женщин

Посев на уреаплазму является «золотым стандартом» диагностики уреаплазма парвум и других её видов. На питательные среды осуществляется посев отделяемого из мочеполовых путей.

При диагностике уреаплазмы у мужчин используется следующий материал для посева на уреаплазму парвум и др.: мазок из уретры, эякулят, секрет простаты. Для посева на уреаплазму у мужчин также можно использовать мочу.

Посев на уреаплазму парвум и др. у женщин берут с мазков из влагалища, уретры, шейки матки. Моча у женщин для посева на уреаплазму не используется.

Если спустя определённый промежуток времени на питательной среде получен рост уреаплазма парвум или другого её вида, то можно оценить результат и уточнить диагноз. В норме результат будет отрицательным, при наличии активности уреаплазма парвум и др. – положительным. При бессимптомном носительстве посев на уреаплазму имеет низкие показатели – менее 10 в 4 степени колониеобразующих единиц уреаплазмы/тампон/мл.

Показатели выше 10 в 4 степени по уреаплазме парвум и др. указывают на активацию инфекции. При результате от 10 в 4 степени в посеве на уреаплазму и выше определяют её чувствительность к антибиотикам. При показателях больше 10 в 4 кое/тампон/мл в посеве на уреаплазма парвум и др. микроб проверяется на чувствительность к разным видам антибиотиков, оценивается количественно, а также по характеру роста колонии. При показателях посева более 10 в 4 степени по уреаплазме лечение (выбор антибиотика) будет зависеть от этих характеристик.

Посев на уреаплазму парвум и др. проводится не только при подозрении на урогенитальную инфекцию, но и с целью контроля эффективности (если была обнаружена уреаплазма) лечения (примерно в конце второй недели после отмены препарата). Об успешности лечения можно судить по титру. Если результат посева обнаруживает титр менее 10 в 4 степени по уреаплазме, то имеется значительный положительный эффект от лечения. Если титр составляет более 10 в 4 степени по уреаплазме, то необходима коррекция лечения и его продолжение.

Анализ на антитела к Ureaplasma urealyticum , parvum IgG , IgA , IgM

Уреаплазма парвум и уреалитикум, как условно-патогенный организм, слабо провоцируют иммунные реакции. Поэтому в крови не всегда удаётся выявить антитела к уреаплазма уреалитикум, парвум. Данный вид исследования при подозрении на уреаплазмоз является вспомогательным и может предоставить некоторую дополнительную информацию по характеру течения инфекции.

Антитела к Ureaplasma urealyticum, parvum класса IgG говорят о факте наличия иммунитета против уреаплазмы парвум или уреалитикум. IgG к Ureaplasma urealyticum, parvum могут обнаруживаться и при полном отсутствии клинических симптомов. Нарастание титра антител IgG к уреаплазма парвум и др. в парных сыворотках, взятых с двухнедельным интервалом, указывает на текущую инфекцию. IgA к уреаплазма парвум и уреалитикум тоже находят у части здоровых людей. Но если за две недели наблюдается рост и без того высоких титров IgA , можно думать о текущей инфекции, вызванной уреаплазма парвум или др.

Обнаружение ДНК Ureaplasma urealyticum, parvum

Проводится с помощью методики ПЦР, которая позволяет выявлять частицы ДНК микроба, представленные в образце материала в количестве выше пороговых значений. Положительный результат анализа бывает при наличии инфекции, либо у носителей уреаплазмы, когда симптомы отсутствуют.

При наличии инфекции, которую могла вызвать уреаплазма, лечение проводится после лабораторного подтверждения. Для получения точного результата лабораторные исследования на уреаплазма парвум и др. должны осуществляться в комплексе.

Источник