Антинуклеарный фактор
Описание | Показания | Подготовка | Интерпретация |
Описание исследования
Наличие антинуклеарных антител является индикатором системных заболеваний соединительной ткани. С помощью данного исследования проводится диагностика аутоиммунных заболеваний.
Системные ревматические заболевания (системная красная волчанка в т.ч.) сопровождаются реакцией иммунной системы организма против соединений нуклеиновых кислот и белков (нуклепротеиновых антигенов), образующихся в результате апоптоза клеток эпителия (последовательности реакций, заложенных в генетическом коде, при которых происходит удаление поврежденных или неполноценных клеток). Образовавшиеся комплексы имеют сходство с чужеродными вирусными частицами, чем и объясняется развитие иммунного ответа. При ускорении процесса апоптоза под влиянием внешних факторов (это могут быть УФО, вирусные инфекции, лекарственные средства) с одновременным сбоем удаления его продуктов происходит запуск аутоиммунных процессов. При этом мишенями для аутоантител становятся апоптотические тельца, в которых конденсируются нуклепротеиновые антигены.
На сегодняшний день сделано описание более 200 видов антител к нуклепротеинам и рибонуклеиновым кислотам. Им дано общее название «антинуклеарные антитела». Аутоантитела не всегда являются токсичными для клеток организма при аутоиммунных заболеваниях. Однако у иммунных комплексов есть способность запуска иммунологического воспаления. Наибольшую опасность этот процесс представляет для тонких сосудов, расположенных в коже, синовиальной оболочке, почках, центральной нервной системе, плевре.
Посредством исследования антинуклеарного фактора (основного метода тестирования антиядерных антител) проводится выявление аутоантител к:
- рибонуклеопротеинам;
- нуклеиновым кислотам (РНК, осДНК, дсДНК);
- конформационным и нерастворимым антигенам (большинству).
Обнаружение аутоантител в данном исследовании возможно благодаря их связыванию с внутриклеточными антигенами перевиваемой линии клеток эпителия человека (HEp-2), в ядре и внутреннем содержимом которых имеются все характерные для клеток человека антигены. Таким образом, данный тест позволяет единовременно выявить все основные аутоантитела.
Положительный результат теста на АНФ на клеточной линии НЕр2 является маркером многих аутоиммунных заболеваний, в т.ч. системной красной волчанки и системных ревматических заболеваний. Это позволяет использовать данный показатель для обнаружения большинства иммунных заболеваний. При диффузных заболеваниях соединительной ткани (системной красной волчанке и ее кожных формах, разных видах склеродермии, смешанном заболевании соединительной ткани, синдроме Шегрена) положительный ответ теста был обнаружен более чем у 90% обследуемых. Исследование АНФ дает возможность также диагностировать ювенильный ревматоидный артрит и аутоиммунные поражения печени. Кроме того, присутствие антинуклеарных антител отмечается при многих других заболеваниях, как аутоиммунного (например, диабет, тиреоидит), так и инфекционного (вирусный гепатит), онкологического и воспалительного характера. У людей без каких либо симптомов заболевания антинуклеарный фактор присутствует в 1-3% случаев (для людей в возрасте от 65 лет этот показатель несколько выше). Повышенный титр АНФ говорит о повышенной вероятности развития аутоиммунных заболеваний.
Подготовка к исследованию
Материал для анализа рекомендуется сдавать утром натощак, после 8-12 часового ночного перерыва между приемами пищи. Можно пить негазированную воду, от кофе, чая соков следует воздержаться.
- накануне забора крови необходимо воздерживаться от физических и психологических нагрузок;
- за сутки до обследования не употреблять спиртные напитки, минимум за час – не курить;
- перед сдачей крови по согласованию с лечащим врачом прекратить прием лечебных препаратов, которые могут повлиять на результаты обследования;
- непосредственно перед отбором пробы желательно 10-15 минут провести в спокойствии.
Забор крови не проводится сразу после массажа, физиопроцедур, флюорографии, кольпоскопии, гастроскопии, биопсии, рентгеновского, мануального, инструментального, ректального, ультразвукового исследования, других терапевтических и/или диагностических манипуляций.
Показания к исследованию
Тестирование предназначено для выявления факта аутоиммунного поражения соединительной ткани.
Интерпретация исследования
Результат обследования описывается расчетным показателем – коэффициентом позитивности (КП):
КП = оптическая плотность конкретной пробы/пороговое значение
Универсальность коэффициента позитивности позволяет применять его при проведении всех иммуноферментных исследований. Данная величина отражает, насколько позитивен конкретный показатель анализа. Он дает возможность врачам более точно истолковывать полученные данные.
- отрицательный – (норма) КП 1.2
Положительный ответ может являться признаком повышенной вероятности аутоиммунного поражения соединительной ткани. При этом важно знать, что получение положительного результата не является однозначным подтверждением наличия патологии, т.к. антинуклеарные тела обнаруживаются приблизительно у 1-3% здоровых людей, у 10-67% лиц в возрасте от 60 лет. И наоборот, могут отсутствовать приблизительно у 5% лиц с системной красной волчанкой (АНФ-отрицательная СКВ).
Отрицательный ответ говорит о невысокой вероятности наличия системных аутоиммунных заболеваний.
Сомнительным считается результат, близкий к предельному значению. Он может быть получен при низком уровне антител или ложноположительной нетипичной реакции. При получении такого результата необходимо через одну-две недели повторно провести исследование крови, чтобы наблюдать в динамике изменение показателей.
Результат теста выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример по данному анализу представлен ниже:
Ф.И.О.: Иванов Сидор Петрович Пол: м Дата рождения: хх.хх.хххх
Дата исследования: хх.хх.хххх
Источник
Что значит высокие титры анф
Общая информация об исследовании
Определение антинуклеарного фактора (АНФ) является «золотым стандартом» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний.
Патогенез системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) тесно связан с нарушениями в иммунной системе и повышенной выработкой антител к структурам собственных клеток. Аутоантитела к компонентам ядра клеток – антинуклеарные антитела – взаимодействуют с нуклеиновыми кислотами и белками ядра, антигенами цитоплазмы, что проявляется воспалительными изменениями в тканях и органах, болями в суставах и мышцах, выраженным утомлением, потерей веса, кожными изменениями. АНА обнаруживаются при многих аутоиммунных заболеваниях, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). АНА встречаются более чем у 90 % больных системными заболеваниями соединительной ткани, в настоящее время описано около 200 разновидностей, которые объединены единым названием – антинуклеарный фактор.
При определении АНФ методом непрямой флюоресценции чаще используется перевиваемая линия эпителиальных клеток аденокарциномы гортани человека НЕр-2. Клетки НЕр-2 являются очень удобным субстратом для лабораторного исследования, так как обладают крупными ядрами и на стеклах растут в один слой. АНА выявляются при связывании с внутриклеточными антигенами клеток НЕр-2.
При исследовании эпителиальные клетки НЕр-2 выращивают на стеклах, фиксируют и инкубируют с разведенной сывороткой крови пациента. После удаления избытка сыворотки клетки инкубируют с меченными флюоресцеином антителами, затем снова промывают и исследуют с помощью флюоресцентного микроскопа. При этом определяется титр антител и тип свечения. Диагностически значимым считается титр более 1:160. При обострении ревматических заболеваний он превышает 1:640, а в период ремиссии снижается до 1:160-1:320. Чем больше антител, тем выше титр. По типу свечения можно установить мишени антинуклеарных антител, что имеет важное клиническое значение и определяет тактику дальнейшего обследования пациента. Основными являются периферический, гранулярный (мелко-/крупно-), ядрышковый, центромерный и цитоплазматический типы окрашивания ядра. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.
Гомогенное (диффузное) окрашивание связано с наличием антител к двуспиральной ДНК, гистонам и характерно для СКВ и лекарственной волчанки.
Периферическое свечение обусловлено периферическим распределением хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ. Данный тип свечения важно дифференцировать от окрашивания ядерной мембраны, которое происходит при аутоиммунных заболеваниях печени.
Гранулярное (крапчатое, сетчатое) окрашивание встречается наиболее часто и является наименее специфичным, выявляется при многих аутоиммунных заболеваниях. Аутоантигенами в данном случае выступают нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, U1-RNP, SS-A, SS-B антигены и PCNA).
Очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения часто указывают на смешанное заболевание соединительной ткани.
Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание обусловлено антителообразованием к компонентам ядрышка (PHК-полимераза-1, NOR, U3RNP, PM/Scl), выявляется при склеродермии, болезни Шегрена. АНА иногда повышаются при эндокринных заболеваниях (сахарном диабете 1-го типа, тиреоидите, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), кожных заболеваниях (псориазе, пузырчатке), при беременности, после трансплантации органов и тканей, у больных на гемодиализе.
Центромерное свечение появляется при наличии антител к центромерам хромосом и характерно для формы склеродермии – CREST-синдрома.
Цитоплазматический тип свечения связан с антителами к тРНК-синтетазе, в частности к Jo-1, что характерно для дерматомиозита и полимиозита. Данный тип окрашивания также определяется при наличии антител к другим компонентам цитоплазмы при аутоиммунном гепатите, первичном билиарном циррозе.
Одновременное выявление различных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.
У здоровых людей может быть обнаружено мелкогранулярное свечение при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме крупнозернистые или гомогенные типы свечения не должны определяться.
В зависимости от результатов оценки типа свечения разрабатывается дальнейшая тактика лечения пациента и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики системных заболеваний соединительной ткани.
- Для дифференциальной диагностики ревматических болезней.
- Чтобы оценить эффективность терапии аутоиммунных заболеваний.
- Для наблюдения за течением системных заболеваний соединительной ткани.
Когда назначается исследование?
- При симптомах аутоиммунного заболевания (длительное повышение температуры, боли в суставах, усталость, потеря массы тела, изменение кожных покровов).
- При выявлении изменений, характерных для системных заболеваний соединительной ткани (повышение СОЭ, уровня С-реактивного белка, циркулирующих иммунных комплексов).
Источник
Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 (АНФ)
Описание
Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 (АНФ) — это тест для выявления антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции.
При системной красной волчанке (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях, иммунный ответ направлен против нуклеопротеиновых антигенов, т.е. комплексов нуклеиновых кислот и белков. Эти эндогенные нуклеопротеиновые комплексы образуются в ходе процесса апоптоза эпителиоцитов и напоминают чужеродные вирусные частицы. Ускорение процессов апоптоза под действием ультрафиолетового облучения, вирусных инфекций и лекарственных препаратов, запускает аутоиммунные ответы при СКВ. При апоптозе основные антигены антител конденсируются в апоптотических тельцах, которые становятся мишенью для аутоантител. В настоящее время описаны около 200 разновидностей антител к нуклеопротеинам и рибонуклеиновым кислотам, которые получили название антинуклеарные антитела. При аутоиммунных заболеваниях аутоантитела к ядерным антигенам не обладают прямым цитотоксическим действием на клетки человека, однако иммунные комплексы способны запускать иммунологическое воспаление особенно в местах, где сосуды особенно тонки, в том числе в почках, коже, ЦНС, синовиальной оболочке суставов, плевре.
Исследование антинуклеарного фактора (АНФ) представляет собой основной метод выявления антинуклеарных антител, позволяя выявлять аутоантитела к нуклеиновым кислотам (дсДНК, осДНК, РНК), рибонуклеопротеинам, а также большинству конформационных и нерастворимых антигенов.
Антинуклеарные антитела обнаруживаются благодаря их связыванию с внутриклеточными антигенами перевиваемой линии клеток эпителия человека (HEp-2). Ядро и цитоплазма клеток НЕр-2 содержит все антигены, характерные для человеческого организма, что позволяет выявлять в одном тесте все основные антинуклеарные антитела. Метод непрямой иммунофлюоресценции на клеточной линии НЕр2 рекомендован в качестве золотого стандарта выявления антинуклеарных антител ведущими европейскими (EASIgroup2010) и американскими экспертами (ACRANATaskforce2008). В силу многообразия антигенов антинуклеарных антител, не все они могут быть очищены или синтезированы для использования в иммуноферментных тестах по выявлению антинуклеарных антител.
Позитивность по АНФ на клеточной линии НЕр-2 отмечается при системной красной волчанке (СКВ), системных ревматических заболеваниях и многих аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным тестом в обследовании больных с аутоиммунной патологией. Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, такими как системная красная волчанка и кожные формы этого заболевания, склеродермия и ее разновидности, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шегрена. Выявление АНФ имеет большое значение в диагностике ювенильного ревматоидного артрита и аутоиммунных заболеваний печени. Представители этого семейства аутоантител могут быть обнаружены при множестве других аутоиммунных (тиреоидит, диабет), инфекционных (вирусный гепатит), воспалительных и онкологических заболеваний. Встречаемость АНФ достигает 1–3% у клинически здоровых людей и несколько возрастает у лиц старше 65 лет. Лица с высокими титрами АНФ имеют повышенный риск развития аутоиммунных заболеваний.
Показания:
- Системная красная волчанка.
- Подострая кожная волчанка и другие разновидности кожной волчанки.
- Смешанное заболевание соединительной ткани.
- Синдром Шегрена и ассоциированные заболевания.
- Диффузная и локализованная склеродермия, CREST-синдром.
- Воспалительные миопатии (полимиозит и дерматомиозит).
- Ювенильный хронический артрит.
- Аутоиммунный гепатит.
- Первичный билиарный цирроз и склерозирующий холангит.
- Полинейропатии и миелит.
Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак или спустя 4–6 часов после последнего приема пищи. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.
Интерпретация результатов
Единицы измерения: титр.
Источник