Что значит стромальный компонент поджелудочной железы
ДЛЯ ТОГО ЧТОБЫ СКАЧАТЬ СТАТЬЮ В ФОРМАТЕ PDF ВАМ НЕОБХОДИМО АВТОРИЗОВАТЬСЯ, ЛИБО ЗАРЕГИСТРИРОВАТЬСЯ
Цель исследования – определить гистогенез анапластических участков опухоли и окружающей стромы при протоковом раке поджелудочной железы. Установлено, что эпителиально-стромальные взаимодействия при протоковом раке поджелудочной железы обуславливают его агрессивное биологическое поведение, резистентность к химиотерапевтическому лечению и различную выживаемость в зависимости от степени дифференцировки опухоли. Гетерогенность протокового рака проявляется в появлении анапластического (саркомоподобного) компонента, в котором прослеживается способность эпителиальных опухолевых клеток приобретать свойство мезенхимальных клеток, не требующих наличия стромы для своего развития и обладающих агрессивным злокачественным потенциалом, влияющим на выживаемость больных.
В настоящее время большое количество научных работ сосредоточено на изучении эпителиально-стромальных взаимоотношений играющих важную роль в прогрессии эпителиальных опухолей в сторону дедифференцированного, т.е. более злокачественного фенотипа [1] . Рак поджелудочной железы (РПЖ) – является агрессивным заболеванием и входит в четверку карцином с наименьшей пятилетней выживаемостью [2] . Несмотря на существенный прогресс, достигнутый в изучении протокового РПЖ и развитии подходов к его хирургическому лечению, выживаемость больных остается на низком уровне [3] . Одной из причин этого является выраженная десмопластическая реакция стромы опухоли, составляющая до 70–80% объема опухолевой ткани [4, 5] , проявляющаяся вгиперэкспрессиибелков внеклеточного матрикса и пролиферацией миофибробластов [6] . Ряд исследований подчеркивают важную роль развитой десмопластической стромы РПЖ, в «защите» от химиотерапии опухоли и (или) увеличении риска метастазирования опухолевых клеток [7, 8] .
Одним из ключевых механизмов прогрессии РПЖ, как и других вариантах опухолей, считают эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП). Известно, что утрата полярности клеток в карциномах ведет к изменению их цитоскелета, при этом одним из признаков ЭМП является утрата клетками цитокератиновых промежуточных филаментов и приобретение виментиновых. Также, ЭМП сопровождается изменением профилей транскрипции генов, в том числе компонентов цитоскелета и внеклеточного матрикса, а также протеолитических ферментов, участвующих в деградации последнего [10] . Фенотипические изменения ЭМП включают снижение экспрессии белков эпителиальных маркеров (таких как Е-кадгерин, десмоплакин и др.) и появление и (или) усиление экспрессии белков мезенхимальных маркеров (виментин, фибронектин, гладкомышечный актин и др.) [11] . Изменение микроокружения и утрата полярности могут способствовать снижению дифференцировки опухолевых клеток [12] , однако полной утраты тканеспецифических свойств никогда не происходит. Так, при потере дифференцировки эпителиальные опухоли продолжают сохранять часть признаков исходной ткани, считается, что они способны к редифференцировке [13] . Кроме того, в процессе утраты дифференцировки опухолевых клеток может происходить возобновление синтеза эмбриоспецифических белков, характерных для «незрелых» клеток [14] .
Цель исследования – определить гистогенез анапластических участков опухоли и окружающей стромы при протоковом раке поджелудочной железы.
Материал и методы
Выполнен анализ операционного материала от 118 больных протоковой аденокарциномой поджелудочной железы (ПАК ПЖ), находившихся на лечении в медицинских учреждениях г. Москвы в период с 2005 по 2013 гг. Среди больных ПАК ПЖ преобладали мужчины (1,3:1). Возраст больных колебался от 40 до 80 лет. Средний возраст мужчин – 61 год, средний возраст женщин – 52 года.
Материал фиксировали в 10% забуференном растворе формалина, затем заливали в парафин по обычной методике. Серийные парафиновые срезы толщиной 3 мкм депарафинировали по стандартной схеме, окрашивали гематоксилином и эозином. Иммуногистохимическое исследование проводили на серийных парафиновых срезах толщиной 2 мкм по стандартой методике с применением следующей панели поликлональных антител: р63, кальпонин, гладкомышечный актин (ГМА), общий цитокератин, цитокератин 7, виментин, Е-кадгерин (Dako, LabVisionFlex, Дания). Интенсивность пероксидазной метки оценивали полуколичественным методом с учетом интенсивности окрашивания и количества антиген-позитивных клеток. Иммуногистохимическая реакция оценивалась как негативная («−» – нет реакции), слабопозитивная («+» – 10% клеток средней интенсивности окраски) и выраженная («+++» – >50% клеток высокой интенсивности окраски). Для проведения ИГХ-реакции применялась техника tissuemicroarrays (TMA), сконструированная в формате multitumorarrays. Данная модель состояла из 24 образцов первичной опухоли от разных больных, при этом от одного больного использовались образцы с разной степенью дифференцировки опухолевых клеток. Таким образом, это позволило осуществить скрининг определенного молекулярного повреждения во всем разнообразии представленных опухолей с наименьшей затратой реактивов и времени. Для получения цветного изображения использовали сканер Miraxdesk (Zeiss, Германия).
Результаты
Протоковая аденокарцинома поджелудочной железы имеет вид узла неправильной формы без четких границ, размерами от 2 до 10 см, на разрезе матового белесовато-серого или беловатожелтого цвета, каменистой плотности. Нередко в центре опухоли можно обнаружить очаги распада с формированием полостей различной формы. В большинстве случаев 78,8% (93 из 118) опухоль представлена железистыми структурами неправильной формы, состоящими из опухолевых клеток с различным содержанием муцина, выраженной десмопластической реакцией стромы, как правило, занимающей большую долю опухолевой массы (от 50–80%).
Однако в 21,2% (25 из 118) случаев в классическом гистологическом варианте ПАК ПЖ в опухоли наряду с железистыми структурами обнаружен анапластический (саркомо-подобный) компонент, представленный крупными полиморфными или веретенообразными клетками с гиперхромными ядрами, иногда многоядерными, с минимальным стромальным компонентом (рис. 1). Объем анапластического компонента разнился и составил от 5 до 20% общей массы опухоли, но во всех случаях не являлся преобладающим.
При проведении ИГХ-реакции обнаружены различия в экспрессии маркеров в железистом и анапластическом компонентах ПАК ПЖ. Так, выраженная экспрессия гладкомышечного актина (+++) отмечена только в десмопластической строме, окружающей железистые структуры. В опухолях с анапластическим компонентом также отмечена выраженная положительная реакция с ГМА, выявленная как в гладкомышечных волокнах, так и в единичных крупных анапластических опухолевых клетках. Помимо этого, как в строме, так и в эпителиальном анапластическом компоненте отмечена выраженная диффузная реакция с виментином (+++) (рис. 2), отсутствующая в железистых структурах (рис. 3). Одновременно в отдельных анапластических клетках отмечалась потеря экспрессии общего цитокератина и цитокератина 7 при сохраненной экспрессии эпителиального-мембранного антигена. Также, в ядрах анапластических клеток отмечена положительная реакция с р63, который может рассматриваться как маркер базальных стволовых клеток (рис. 4).
В опухолях без анапластического компонента, доля окрашенных ядер с антителами к р63 была ниже и представлена единично окрашенными ядрами по периферии железистых структур. Также при раке поджелудочной железы происходила редукция экспрессии белка Е-кадгерина и изменение полярности его экспрессии, а именно исчезновение мембранного окрашивания и появление цитоплазматического с разной степенью интенсивности. В опухолевых клетках железистых структур ПАК в 66,7% (62 из 93 случаев) наблюдалась умеренно-выраженная (++) цитоплазматическая экспрессия данного белка; в 30,1% (28 из 93) – выраженная цитоплазматическая (+++). Мембранная реакция наблюдалась только в 3,2% (3 из 93) случаев. В анапластическом компоненте во всех случаях отмечена отрицательная как мембранная, так и цитоплазматическая экспрессия белка Е-кадгерина.
Заключение
Классический вариант протоковой аденокарциномы поджелудочной железы по своей гистологической структуре, как правило, неоднородная опухоль, которая представлена полями ткани различной дифференцировки от высокой до низкой, включая анапластический компонент. В исследуемой серии анапластический компонент присутствовал в 21,2% (25 из 118) случаев. По нашему убеждению, его необходимо выделять даже при минимальном его объеме от общей массы опухоли, поскольку опухоли с анапластическим компонентом имеют не только различия в гистологическом строении, но и в злокачественном потенциале, а также по экспрессии эпителиальных, миоэпителиальных и мезенхимальных иммуногистохимических маркеров. Гистологически десмоплазия стромы, которая характерна для протокового рака поджелудочной железы, полностью отсутствует в анапластических участках. Опухолевые клетки, плотно располагаясь друг к другу, как бы создают «стромальный каркас» из самих себя (рис. 5).
Кроме того, выявленная в анапластических клетках диффузная экспрессия виментина, гладкомышечного актина и р63 подтверждает, что в процессе потери дифференцировки опухолевые клетки приобретают миоэпителиальный и (или) мезенхимальный фенотип. Данный факт, вероятно, связан с эпителиально-мезенхимальным переходом опухолевых клеток, основными критериями которого являются утрата эпителиальной полярности, разделение на отдельные клетки и дисперсия при приобретении клеточной подвижности. При этом происходит разрушение плотных адгезионных контактов (редукция и изменение полярности экспрессии Е-кадгерина) и реорганизация комплексов, обеспечивающих прикрепление клетки к субстрату. Однако частично сохраненная экспрессия цитокератинов и эпителиального мембранного антигена свидетельствует о сохранении цитокератиновых рецепторов и возможной обратной трансформации при изменении микроокружения. В работе A. Kabashima-Niibe с соавт. показано, что ингибирование трансформирующего фактора роста-β в протоковом раке поджелудочной железы приводит к обратному мезенхимально-эпителиальному переходу и потере мезенхимального и восстановлению эпителиального фенотипа [15] . Наличие анапластического компонента в опухоли существенно влияет на продолжительность жизни больных с протоковой аденокарциномой поджелудочной железы, снижая ее практически в два раза. Медиана жизни у больных в группе без анапластического компонента составила 14 мес., против 6 мес. при его наличии (р = 0,00016) [16] .
Таким образом, возрастающий интерес исследователей к эпителиально-стромальным взаимодействиям в протоковом раке поджелудочной железы обусловлен его агрессивным биологическим поведением, резистентностью к химиотерапевтическому лечению и различной выживаемостью в зависимости от дифференцировки опухоли. Гетерогенность протокового рака проявляется в появлении анапластического (саркомоподобного) компонента, в котором прослеживается способность эпителиальных опухолевых клеток приобретать свойство мезенхимальных клеток, не требующих стромы и обладающих агрессивным злокачественным потенциалом, влияющим на выживаемость больных.
Источник
Что значит стромальный компонент поджелудочной железы
Изучение стромального компонента поджелудочной железы в возрастном аспекте, является актуальным и представляет практический интерес. В доступной литературе отсутствуют количественные данные, характеризующие нормальное содержание коллагена в строме поджелудочной железы в пренатальном и неонатальном периодах развития. Цель работы — изучение развития стромы поджелудочной железы плодов и новорожденных.
Материал и методы
Исследование проводилось на секционном материале (поджелудочные железы плодов и умерших новорожденных), собранном в патологоанатомическом отделении ГУЗ АОКБ г. Архангельска (72 случая). Аутопсийный материал забирали в течение суток после смерти, фиксировали в 10 % растворе нейтрального формалина. После этого готовили парафиновые блоки по общепринятой методике, гистологические срезы окрашивали пикрофуксином по Ван-Гизону. С помощью окулярных тест-систем определяли удельную плотность стромы в поджелудочной железе и удельную плотность коллагеновых волокон в строме. Результаты морфометрии обрабатывали при помощи статистических программ SPSS 13,0.
Полученные результаты
При обзорной микроскопии в железах плодов 20-40 недель развития и новорожденных структура железы в основном соответствовала сроку гестации.
В каждой возрастной группе определяли удельную плотность стромы и коллагеновых волокон. С увеличением возраста гестации выявлено достоверное уменьшение удельной плотности стромального компонента поджелудочной железы плодов на 22,6 % (р
Источник
Поджелудочная железа: размеры, норма
В пищеварительную систему входит такой орган, как поджелудочная железа. Она способствует перевариванию пищи. Имеется в виду жирная, углеводистая, белковая еда. Благодаря такому органу происходит регуляция углеводного обмена в организме. При развитии различных патологических процессов или заболеваниях повышается риск серьезного последствия для поджелудочной железы.
Форма
Во время ультразвукового исследования определяется форма и отклонение от нормы. При отсутствии каких-либо проблем, орган будет иметь S образную форму. В некоторых ситуация можно выявить патологию, которая выражается в нарушенной форме. Орган может быть кольцевидной, спиральной, расщепленной, добавочной формы. Аномалия, которая выявлена с помощью узи, это изолированный дефект поджелудочной или часть тяжелого патологического процесса.
В большинстве случаев, ультразвуковое исследование способно выявить только косвенные симптомы. Речь идет о сужении или дополнительном протоке. В такой ситуации врач может назначить другое исследование, чтобы исключить иди подтвердить отклонение.
Размер
Диагностическое ультразвуковое исследование заключается также в измерении параметров поджелудочной железы. У взрослого человека норма размера варьируется от 14 до 22 сантиметров. Весит такая поджелудочная железа около 75 грамм. Орган состоит из головки, где расположен крючковидный отросток (длина такого отростка приблизительно три сантиметра), тела (длина колеблется от 1.5 до 1.7 сантиметра) и хвоста (размер около двух сантиметров).
Головку охватывает двенадцатиперстная кишка. Локализацией является уровень первого и начало второго поясничного позвонка. У протока поджелудочной железы ровная гладкая стенка. Ее диаметр не превышает один миллиметр в теле и двух миллиметров в головке. Колебание параметров может происходить как в меньшую, так и в большую сторону.
Каждый вид патологического процесса отличается различной картиной, которая видна во время ультразвукового исследования. Воспалительный процесс, который сопровождается отечностью, характеризуется увеличением участка от головки до хвоста. При наличии опухоли будут увеличиваться отдельные пораженные части. К примеру, злокачественное образование более чем в 55 процентах случаев расположено в головке поджелудочной железы. В таком случае голова органа увеличиться более 4 сантиметров. Около 15 процентов случаев диагностируют онкологию тела поджелудочной железы. Будет увеличено тело органа.
Контур
Норма это наличие ровных и четко очерченных контуров. Имеются в виду все составляющие органа (головка, тело, хвост). При расплывчатых очертаниях можно предположить, что развивается воспалительный процесс в поджелудочной железе. Часто встречается, что отечность спровоцирована органом, который расположен рядом. К примеру, возникновение реактивного отека поджелудочной связано с гастритом, язвой желудка и двенадцатиперстной кишки.
Киста и абсцесс способствуют появлению выпуклых и гладких контуров на отдельных участках органа. Неровности границы являются последствием панкреатита и опухоли, размер которой не превышает один сантиметр, и которая расположена на поверхности. Внешние границы могут измениться, если сформировалось крупное новообразование, размер которого превышает два сантиметра.
Структура
С помощью ультразвукового исследования определяется структура поджелудочной железы, учитывая плотность. Нормой является зернистая структура, средняя плотность, которая похожа на плотность печени или селезенки. На мониторе определяется наличие равномерной эхогенности с небольшим вкраплением. Если изменена плотность органа, будет изменяться отражение ультразвуковых волн.
Может наблюдаться увеличение (гиперэхогенность) или уменьшение (гипоэхогенность) плотности. Визуализация гиперэхогенности связана с хроническим панкреатитом. Наличие частичной гиперэхогенности говорит о камне или опухоли. Выявить гипоэхогенность можно во время острого панкреатита, отечности и злокачественных новообразованиях. Киста или абсцесс характеризуется наличием эхонегативных участков, когда не происходит отражения ультразвуковых волн. В таком случае на мониторе видны белые участки. Практика показывает, что во время ультразвукового исследования выявляется смешанная эхогенность, когда совмещается гиперэхогенная и гипоэхогенная область.
Как расшифровывают результаты
Когда окончено ультразвуковое исследование, квалифицированный врач оценит полученные данные, на основании которых выносится заключение. В нем происходит полная расшифровка результата обследования поджелудочной железы. Наличие какой-либо болезни или подозрение на нее характеризуется совокупностью нескольких изменений.
При незначительных отклонениях поджелудочной железы от стандартного показателя нет необходимости ставить точный диагноз. Расшифровку врач проводит после ультразвукового исследования, на это потребуется приблизительно 15 минут.
Источник
